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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
Universal SDS-PAGE separating gel buffer solution
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
500ml
通用SDS-PAGE分离胶-浓缩胶缓冲液
规格:500ml英文名:Universal SDS-PAGE separating gel buffer solution
产品介绍:
本产品利用聚丙烯酰胺凝胶电泳原理,采用优化的预混合配方和通用分离/浓缩胶配制缓冲液,分离胶/浓缩胶可以同时一次配制完成。因此极大程度上简化了凝胶制备的操作流程,降低了实验人员接触剧毒试剂的机率。只需要一个凝胶制备系统,一小时内可以快速、方便、安全、稳定的配制出各种浓度的高质量的SDS-聚丙烯酰胺凝胶,适用于各个实验室的蛋白电泳和制胶设备,比预制胶更加灵活、经济。
注意事项:
需自备30%丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液 (Acr-Bis solution,推荐36.5:1,丙烯酰胺146克和甲叉双丙4克溶于纯水,定容到500ml)、10% APS(过硫酸铵)、TEMED。
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文献和实验迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 Q:配胶缓冲液系统对电泳的影响? A:在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩
,以确保胶条插入位置准确。合拢灌胶模具后并直立放置,双手均匀用力向下扣住翼型扳手以关闭灌胶模具。若位置正确,校准卡应该可以正常上下抽拉活动而不被夹在胶条与玻璃板之间。(图3- 5) •用5 ml分离胶溶液(图 6)制备浓度为12%的SDS-PAGE凝胶,然后用移液管将1 ml乙醇滴入装好的灌胶模具中。等候60分钟使凝胶聚合。当把溶液倒入玻璃板夹层之间时,将移液管嘴直接置于玻璃板之间,缓慢地滴出液体,尽量避免形成气泡。凝胶完成聚合后,移除乙醇,将制备好的浓缩胶溶液倒入到分离胶上。轻轻将0.75 mm
1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响? 在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起
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