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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验罗氏蛋白亲和纯化树脂:cOmplete His-Tag Purificatio
cOmplete His-Tag Purification Resin 灵活纯化蛋白、保证效能 选择靶蛋白适宜的缓冲条件 cOmplete His-Tag Purification Resin是一种新型的高效能IMAC基质,用于裂解液中His标签蛋白的一步法纯化,操作方便。采用罗氏特殊的镍螯合化学
,在中性和弱碱性条件下可以和固定化的金属离子相互作用(如Ni离子,Zn离子,Co离子等),从而达到纯化蛋白的目的。此系统的洗脱方式可以用过三种非特异性步骤达成: 降低pH(4.5-6) b. 加入EDTA C.不同浓度咪唑溶液(20-250mM) 当蛋白洗脱完毕后,使用EDTA使纯化树脂与金属离子分离,即可完成树脂的再生。 Strep-tag®则是基于链霉亲和素(Streptavidin)和生物素这一自然的相互作用,将Strep-tag®II(WSHPQFEK)或Twin-Strep-tag®
系统,都使用了亲和层析法来纯化得到所需的蛋白质,为目前所常用的技术方法。 His-tag 系统又很高的蛋白产量(5~40 mg/mL resin),但理想情况下的纯度约为 80% 左右。但如需在随后的分析中测量蛋白质的功能,就需要再进行更多的 cleaning steps; Strep-tag® 系统一步纯化满足的纯度可达到 95%,无需进行更多的纯化步骤即可直接进行蛋白的分析,产量数据为 16 mg/mL。 深度对比 Strep-tag® 与 His-tag His-tag
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