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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验The final working concentration of ROX Standard in the PCR buffer is 0.5 µMolar (1X). SYNTHEGEN's ROX Standards are shipped in liquid form at a concentration of 100 µMolar (200X).
扩增曲线的分析攻略。 1、确认软件设置是否正确 对照试剂盒说明书,检查时间、温度、循环数、荧光采集等是否设置正确。有一个比较容易忽略的设置问题是,需要看下所选用的试剂中是否含有 ROX 来作为参比荧光染料。Applied Biosystems™ 系列荧光定量 PCR 仪器可以用 ROX 来作为参比荧光染料,用以校正仪器系统以外的物理误差,比如均一化校正由于移液误差或者蒸发导致的批内体积误差等。目前市面上有的的荧光定量 PCR 预混液是不含有 ROX 的,当用此类试剂的时候,应该将 ROX 参比
。G. 反应体系的设置:A-G这五个步骤简单设置好,可以保存,修改反应程序或者立刻进行反应。需要注意一点ABI仪器需要加ROX参比染料,默认的是ROX。有些公司是把ROX或者其他染料配制在MasteMix里面;也有的是单独分开。要根据不同公司的MasterMix进行这一个步骤的选择。BioTeke的MasterMix里没有参比染料,所以选择“none”。设置好之后,就可以把配置好的PCR管放进仪器,点击RUN!Real-time qPCR数据分析1. Real-time qPCR常见参数基线
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