PVDF膜/滤纸三明治，Sequi-Blot，8.5x13.

BIO-RAD（伯乐）电泳仪、电泳槽

使用者最大凝胶尺寸(W x L) 24 x 16 cm缓冲液要求200 ml凝胶容量≤3 块PROTEAN® II 凝胶三明治*3 块Criterion™ 凝胶4 块Mini-PROTEAN® 3 凝胶4 块Ready Gel® 预制胶 电源PowerPac™ HC 电源简介： 体积(W x L x H) 37 x 24 x 11 cm Sequi-Gen GT 测序电泳槽简介: 拥有专利* Sequi-Gen GT 测序电泳槽使测序胶的铺制和电泳变得更简单。系统设计避免

Western Blot(免疫印迹法)步骤

,500- 1000μl/瓶) ，刮落细胞，转移到Ep管。注意：冰上操作。 4.超声 10~15秒剪切DNA以减低样品粘性。 5.煮沸样品5 minutes。 6.离心12000g，5 min，取上清。 7.电泳分离：上样15μl~20μl 至 SDS-PAGE 胶 (10 cm x 10 cm)电泳。 如要定量检测某蛋白的表达水平， 应用RIPA裂解液(1 ml per 107 cells/100 mm dish/150cm2 flask)裂解

Western Blot(免疫印迹法)实验方法步骤

于大胶的蛋白转移，所用缓冲液少。以下为槽式湿转的操作步骤。 1. 将胶浸于转移缓冲液中平衡10min。 注意： 如检测小分子蛋白，可省略此步，因小分子蛋白容易扩散出胶。 2. 依据胶的大小剪取膜和滤纸6片，放入转移缓冲液中平衡10min。如用PVDF膜需用纯甲醇浸泡饱和3-5秒钟。 3. 装配转移三明治：海绵®3层滤纸®胶®膜®3层滤纸®海绵，每层放好后，用试管赶去气泡。切记：胶放于负极面（黑色面）。 4. 将转移槽置于冰浴中，放入三明治