转印试剂盒，Midi，低荧光PVDF膜，40次

Western Blotting 膜法学堂：选择正确的转印膜，优化

有另外一种情况也是需要选择特殊型号的转印膜，那就是荧光检测的Western Blotting实验。普通型号的Immobilon-P 的PVDF膜由于有高荧光背景而不适合荧光检测。硝酸纤维素膜荧光背景较弱，有些老师也会用于Western Blotting的荧光检测，但也有老师抱怨检测信号不如使用PVDF膜的化学发光强，较弱的条带不易检测。针对这种情况，低荧光背景的Immobilon-FL 型号PVDF膜被研发出来了。Immobilon-FL 型号由于具有比硝酸纤维素膜更低的自发荧光背景，同时又保留

TSA多重免疫荧光染色的实验步骤

实验流程：多靶点免疫荧光染色的实验操作与普通单标记免疫组化流程相似。试剂盒中的荧光染料可以在HRP酶的作用下将信号共价结合到抗原上，随后即可衔接下一轮单标染色，直至全部标记完成，即可复染DAPI后封片观察。1.脱蜡水合：1）新鲜二甲苯浸片10min,重复3次。2）梯度乙醇浸片，100% 5min；95% 5min；70% 2min。3）灭菌水洗片1min，重复3次。4）10%中性福尔马林浸片10min，灭菌水洗片1min，重复3次。2.微波修复：1)将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中，用抗原

待检测样品制备

探针。荧光染料可以是Cy3、Cy5、FITC、fluorescein、Texas red、rhodamine、bodipy或者Alexa dye，而且各种荧光染料的标记效率相当。值得一提的是这种间接荧光标记比直接标记法的效率更高，在双色荧光标记时，可以避免直标法因为Cy5标记效率低而导致Cy3、Cy5两种颜色信号强度不同的现象。试剂盒提供除荧光染料外的全部试剂，足够作10次标记。 6）Vysis公司的Microarray Nick Translation Kit 是配合Vysis公司