转印滚筒

半干转印与湿式转印的区别 | WEALTEC 威泰克

刚接触 Western Blot 不久的用户，在选购 WB 设备时，经常会遇到仪器选型的问题：为什么常见的蛋白质电泳的转膜有两种方式可以选择，干式和湿式，那么哪种方法更适合我们呢？这里我们结合美国 WEALTEC 公司的 E-Blotter 湿转槽和 YRDIMES 快速半干转印槽举例说明。我们一般会优先推荐大家选购 YRDIMES 快速半干转印系统，因为干式转印速度很快（常规转膜 30-60min，快速转膜 7-10min），操作也简单，并且 YRDIMES 快速半干转膜系统性价比非常高

Western转印的优化

从SDS凝胶中进行Western蛋白转印的优化需要对一系列参数进行考虑。目的是转印所有凝胶上的蛋白并将其定量地转移到转印膜上。进行高效转印需要一定程度的优化，尤其是对于大分子量和小分子量蛋白。 转印后，凝胶上应不残留或残留很少的蛋白。可以在转印后进行染色进行检测。转移出凝胶的蛋白应该仅在接触凝胶的膜的一面可见。如果有怀疑，在转印时使用第二个"支持膜"，你可以在转膜后染色，以检查是否有穿膜的迹象。如果发现蛋白残留在凝胶上而且膜的结合性很差，可以考虑下列

Southern 转印分析

在胶体中的DNA 可利用毛细现象的作用将DNA 牵引转印至覆盖在胶片上的滤膜，经烘烤或UV 照射后，可使DNA 固定在膜上，以进行探针的杂合（hybridization） 反应。仪器用具：玻璃缸；玻璃板或吸水海绵；Crosslinker （Stratalinker 1800, Stratagene）药品试剂：10×SSC （1.5 M NaCl; 0.15 M sodium citrate） 或20×SSC变性溶液 （1.5 M NaCl; 0.5 N NaOH）中和溶液 （1 M Tris