脉冲场电泳标尺，8-48kb

脉冲场凝胶电泳技术

分子迁移距离的不同从而可以达到分离不同大小的DNA 分子的目的。在所有分子分型方法中，脉冲场凝胶电泳以重复性好、分辨性强，被作为细菌分子分型的PFGE分型技术因其重复性好、分辩力强被誉为细菌分子分型技术的“金标准”,并推荐作为金黄色葡萄球菌等病原微生物分型的标准技术。 PFGE 琼脂糖的选择 PFGE是以琼脂糖作为支持介质的电泳方法。不同支持物的PFGE其用途及作用效果不尽相同，依据不同的支持物可以将PFGE分为2种。1．SeaKem Gold琼脂糖PFGESeaKem Gold琼脂糖是一种高

【旧帖整理】PFGE（脉冲电泳）

一端指向电场的一极而通过凝胶。这样的迁移模式被形象的称之为“爬行”。 琼脂糖凝胶能分辨的DNA 分子的大小和凝胶孔径相关。低浓度的（〈0.2%）的凝胶可以分辨不大于750kb的DNA分子，但相对而言，这样的凝胶本身很脆弱，而且需要的电泳时间极长。对于超过750kb的样品，常用的电泳方法就无能为力了。 1984年，Schwartz和Cantor报道了脉冲场电泳的设计思想，解决了分离大片段DNA的方法。该方法在凝胶上加了正交的可变脉冲电场，使得DNA分子在“爬行”过程中，因为电场方向的变化，DNA

采用优化红球菌的地高辛标记探针的DNA印迹方案（图）

作为转化溶液，进行毛细管转化 转化过夜（48小时脉冲场凝胶电泳） 另供选择的快速转化方法（Phil 的最爱） 室温下于0.25 M HCl中培养直至染色带变成黄色（20分钟） 将2X置于MilliQ溶液中漂清 如图所示，采用0.4N 的NaOH溶液作为转化溶液，进行毛细管转化 转化过夜（48小时脉冲场凝胶电泳）