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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验脉冲场凝胶电泳 1 )高分子量 DNA 琼脂糖凝胶块制备和加工 1. 收集 10ml 全血,加入 30ml 细胞裂解液。置冰浴中至少 20min 直至红细胞完全溶解。 2. 2000r/min 离心 10min ,移去红色上清液,再次用细胞裂解液洗涤细胞,然后用 PBS 重悬细胞。 3. 稀释单细胞悬液并取一小份用 Neubauer 腔计数细胞。 4. 用 PBS 重悬细胞,以达到
PFEG(Plused-Field Gel Electrophoresis)技术是将细菌完全包裹在一种特殊的琼脂中,然后加入一些化学试剂,比如十二烷基肌氨酸钠,蛋白酶K等,将细菌中的蛋白成分全部溶化,消化,只剩下整个序列的DNA。经稀有限制性内切酶消化后,切割成大小不等的片断,然后将其置于脉冲场电泳槽中电泳,完成片段分离的过程。经染色脱色后,在读胶仪上显现酶切后的电泳图谱,并经统计软件的分析,即可判断出条带的不同,同时做出细菌的同源性分析,从而达到分型的目的。其中能影响电泳图谱的参数
由低熔点PFGE可直接回收DNA,也可首先通过电泳将梯度DNA浓缩进高百分比凝胶,然后进行DNA分子回收。详情请查看下列pdf文件:“脉冲场凝胶电泳中DNA的回收” (如果你无法在线阅读pdf文件,敬请下载安装adobe reader,官方下载,天空下载) 脉冲场凝胶电泳中DNA的回收 本资料来源于网络,如有异议请联系我们,我们将在3个工作日内作出处理。
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