·Pfu DNA Polymerase 编号:XH022 规格:500U/2500U 产品简介: 我们生产的Pfu DNA Ploymerase(高保真TAQ酶)是从克隆有Pyrococcus furiosis DNA Ploymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白,其分子量为90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外切酶活性,它能纠正DNA扩增过程中产生的错配,而传统的Taq酶却不能,其它耐热DNA Polymerase如Vent、Deep Vent、Tli、UITma等虽具有校正功能,但Pfu酶是目前已发现的所有耐热DNA Polymerase中出错率最低的。Pfu酶无5’→3’核酸外切酶活性,PCR反应中的延伸速度一般为0.5-1kb/分钟,比Taq酶要低。Pfu 酶比Taq酶热稳定性更好,95℃ 1小时仍保持90%以上的活性,对于GC含量很高的模板,变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu酶的PCR产物为平末端,可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。一般用于DNA的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和末端补平等。 注意事项: 1、Pfu DNA Ploymerase应储存于-20℃,有效期12个月。 2、取Pfu DNA Ploymerase做PCR反应时,请用高压灭菌处理过的吸头。 3、用Pfu酶扩增时,引物的纯度要求较高,引物长度大于18个碱基,Tm值在55-80℃之间,引物浓度在0.1-0.5uM之间,比Taq酶略高。
活性定义: 1单位(U) Pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃,30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。