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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 库存:
414
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
1ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖北京鲑鱼精DNA(10mg/ml)厂家在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京鲑鱼精DNA(10mg/ml)厂家
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:XH017
规格:1ml
此溶液已经经过处理,可以直接用于DNA杂交。原料来自于SIGMA。
处理配制方法如下:
1. 称取鲑鱼精DNA 2 g置于500 ml烧杯中,加入约200 ml的TE Buffer。
2. 用磁力搅拌器室温搅拌2~4小时,溶解后加入4 ml的5 M NaCl,使其终浓度为0.1 M。
3. 使用氯*(代"仿")抽提两次。加大约2倍体积,取上面冻状物。
4. 回收水相溶液后,使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20次,以切断DNA。
5. 加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀。
6. 离心回收DNA后,溶解于100 ml的去离子水中,测定溶液的OD260值。
7. 计算溶液的DNA浓度后,稀释DNA溶液至10 mg/ml。
8. 煮沸10分钟后,分装成小份(1 ml/份)。-20℃保存。
9. 使用前在沸水浴中加热5分钟后,迅速冰浴冷却。
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·Bradford蛋白浓度测定试剂盒
编号:XH067
规格:2500微孔
本试剂盒自订购之日起九个月内有效。本试剂盒用于酶标板或者200ul比色皿时可做2500孔。当使用2ml比色皿时可做250孔,如果是1ml比色皿时可做500孔。
产品简介:
考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(lmax),由465nm变为595nm,在一定的浓度范围内,测定的吸光度值A595,与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。
操作说明:
一,微孔酶标仪法
1. 完全溶解蛋白标准品,取10ml,加240ulPBS稀释至250ml ,使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
2. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取1ml 5×G250染色液,加入4ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。
3. 将标准品按0, 2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中,加PBS稀释液补足到20微升。
4. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
5. 各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液,室温放置3-5分钟。
6. 用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
7. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
二,分光光度计法
如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。
步骤如下:
1,取八支(或者更多)干净的10ml离心管,标记上号。
2,取100ulBSA,加PBS2.4ml稀释至终浓度为0.2mg/ml。
3,5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取10ml 5×G250染色液,加入40ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。
4,按下表加入试剂(以每孔5ml计,多余的用来润洗比色皿)
5,反应3分钟后测OD值。为了实验的准确性,可每间隔2分钟加一管染色液,每间隔2分钟测一管OD值。
北京鲑鱼精DNA(10mg/ml)厂家关键词:鲑鱼精DNA(,鲑鱼精DNA(10mg/ml),XH017,百奥莱博
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北京鲑鱼精DNA(10mg/ml)厂家关键词:鲑鱼精DNA(,鲑鱼精DNA(10mg/ml),XH017,百奥莱博
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