克氏琼脂

克氏琼脂
英文名称：Kligler's Agar
产品规格：250g
产品用途： 用于铜绿假单胞菌的克氏试验
用途:用于铜绿假单胞菌的生化试验。
成分(g/L)
Beef Extract/牛肉浸粉 3.0
Yeast Extract/酵母浸粉 3.0
Pancreatic Casein Peptone/
胰蛋白胨 20.0
Sodium Chloride/氯化钠 5.0
Lactose/乳糖 10.0
Glucose/葡萄糖 1.0
Ammonium Iron(II)Sulfate Hexahydrate/
硫酸亚铁铵 0.5
Sodium Thiosulfate Pentahydrate/
硫代硫酸钠 0.5
Phdium Red/苯酚红 0.025
Agar/琼脂 13.0
克氏琼脂pH值7.4 ± 0.2 25℃
1、 液体培养基:把培养基配好，液体一般5mL就装试管，50mL-100mL就装到100mL的三角瓶中，高温高压灭菌后待用。和细胞培养不一样的地方就在于，三角瓶和试管由于装了培养基要灭菌，瓶塞需要做棉塞或用膜等透气的东西封口。这些东西直接找有做过的实验室去弄点就行了，自己现做什么的也怪麻烦的。
克氏琼脂固体培养基:在液体培养基中添加一定浓度的琼脂，一般是100mL装瓶，或者是200mL装瓶（装500mL的三角瓶），灭完菌后，在培养基温度降到一定程度，培养基还呈溶液状态的时候，就在超净台加抗生素倒平板。不过别太凉，不然琼脂就凝固成块块了。当然，灭好菌后，也可以等到要用的时候再倒平板，倒之前微波炉加热，溶解琼脂，冷却到一定温度再倒就行。（建议如果以前从来没弄过固体培养基，也找个人替你操作几次）这部分的内容，可以去找一本本科的微生物实验手册看看就行。
2、冻干粉比较好保存，所以在培养基全部准备好之前不用去管冻干粉，扔冰箱就行。都准备就绪以后，直接用500-1000uL的培养基溶解干粉，浓度高，接活率高。然后有几种方法可以选择：
1）.直接将溶好的菌取5-10uL加入到5mL 液体培养基（已经加了抗性）中，37C摇床培养。根据你的冻干粉保存的时间，一般7,8个小时就能看见有没有长了。
2）.为了防止接菌量太少，导致菌体不生长，可以取50-100uL的菌液加入到50mL液体培养基中，37C摇瓶培养，这个按说应该会长得比较快一点，因为通气量大。所以你可以都接上，看情况。
3）.还有为了防止污染，会直接取菌液在固体培养基上划线，这样长出来的是单菌落，根据菌落大小和形态，就可以避免取到污染的菌体。但是这种方法风险最高，因为接菌量小，如果菌体活力稍弱，就容易完全不长。
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