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- 文献和实验
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- 保存条件:
2—25℃
- 保质期:
一年
- 库存:
50
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
5ml*6
英文名称:
产品规格:5ml*6
萋-尼氏染色液产品用途: 用于细菌抗酸染色
1、 液体培养基:把培养基配好,液体一般5mL就装试管,50mL-100mL就装到100mL的三角瓶中,高温高压灭菌后待用。和细胞培养不一样的地方就在于,三角瓶和试管由于装了培养基要灭菌,瓶塞需要做棉塞或用膜等透气的东西封口。这些东西直接找有做过的实验室去弄点就行了,自己现做什么的也怪麻烦的。
萋-尼氏染色液固体培养基:在液体培养基中添加一定浓度的琼脂,一般是100mL装瓶,或者是200mL装瓶(装500mL的三角瓶),灭完菌后,在培养基温度降到一定程度,培养基还呈溶液状态的时候,就在超净台加抗生素倒平板。不过别太凉,不然琼脂就凝固成块块了。当然,灭好菌后,也可以等到要用的时候再倒平板,倒之前微波炉加热,溶解琼脂,冷却到一定温度再倒就行。(建议如果以前从来没弄过固体培养基,也找个人替你操作几次)这部分的内容,可以去找一本本科的微生物实验手册看看就行。
2、冻干粉比较好保存,所以在培养基全部准备好之前不用去管冻干粉,扔冰箱就行。都准备就绪以后,直接用500-1000uL的培养基溶解干粉,浓度高,接活率高。然后有几种方法可以选择:
1).直接将溶好的菌取5-10uL加入到5mL 液体培养基(已经加了抗性)中,37C摇床培养。根据你的冻干粉保存的时间,一般7,8个小时就能看见有没有长了。
2).为了防止接菌量太少,导致菌体不生长,可以取50-100uL的菌液加入到50mL液体培养基中,37C摇瓶培养,这个按说应该会长得比较快一点,因为通气量大。所以你可以都接上,看情况。
3).还有为了防止污染,会直接取菌液在固体培养基上划线,这样长出来的是单菌落,根据菌落大小和形态,就可以避免取到污染的菌体。但是这种方法风险最高,因为接菌量小,如果菌体活力稍弱,就容易完全不长。
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文献和实验1、原理与应用 结核分枝杆菌对苯胺染料一般不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,经此染色后,结核分枝杆菌及其他分枝杆菌呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。 2、材料 (1)结核病人痰 (2)抗酸染色液 (3)玻片、片夹、滤纸片、竹签、空平皿、污物盆。 3、方法 (1)取洁净的竹签沾取痰中血丝或脓性痰,在清洁无油脂玻片上涂开。涂抹区约拇指盖大。用过的竹签放到空平皿内待高压灭菌。 (2)涂片自然干燥后,用片夹挟住玻片一端
,至涂抹均匀部位基本没有红色再脱下为止,水洗。 (6)滴加吕氏美蓝染液30sec,水洗。 (7)吸干、镜检。 4、溶液配制 萋-尼(Zichl-Neelsen)抗酸染色液 (1)石炭酸复红液:硷性复红4g,溶于95%酒精100ml,作成饱和溶液,再取该饱和液10ml与5%石炭酸溶液90ml混匀即成。 (2)3%盐酸酒精液。 浓盐酸3ml加入95%酒精97ml中即成。 (3)吕(Loeffer)氏美蓝染色液
将碘与碘化钾混合并研磨,加入几毫升蒸馏水, 使其逐渐溶解,然后研磨,继续加入少量蒸馏水至碘、碘化钾完全溶解。最后补足水量。也可用少量蒸馏水将碘化钾完全溶解,再加入碘片,待完全溶解后,加水至300ml。 ⑶ 脱色液:95%乙醇 ⑷ 复染液:沙黄2.5g,95%乙醇100ml为贮存液,取贮存液10ml,加蒸馏水90ml为应用液。 2.抗酸染色液 ⑴ 碱性复红染色液: ①萋纳石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱和溶液10ml,5%石炭
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