2×Taq PCR MasterMix(国产,进口)

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北京百奥莱博专业生产供应2×Taq PCR MasterMix(国产,进口)，我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：2×Taq PCR MasterMix(国产,进口)
编号：RFT095
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：500μl|5×500μl
● 储存条件: -20℃可长期保存；4℃稳定贮存3个月。经常使用时，一旦融化后请4℃贮存，尽量避免反复冻融。
● 产品简介：
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂，浓度为2×。使用时，只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应，可最大限度的减少人为误差，具有快速简便、稳定性好等优点。适用于常规PCR反应、复杂模板（如GC含量高，有二级结构）的扩增以及大规模基因检测。使用该产品得到的PCR扩增产物末端含有一个A碱基，可以直接用于TA克隆。
● 质量控制：经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余基因组DNA；能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。

我公司的2×Taq PCR MasterMix(国产,进口)，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销售下列产品：

·植物基因组提取试剂盒
编号：RFT038
规格：50次
● 储存条件和效期：本试剂盒在室温（25℃左右）干燥条件下，可保存1年；更长时间的保存可置于2–8℃。2–8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，应在使用前置于37℃下溶解沉淀至溶液澄清后再使用。单独包装的RNaseA收到后-20℃保存。
● 产品简介：
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，能提取多种植物细胞/组织中的基因组DNA。离心吸附柱可以高效、专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA*(代"片")段大，纯度高，质量稳定可靠。
使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
● 提取得率：材料 DNA得量（μg/100mg）
Arabidopsis 3–4 μg
Barley 8–12 μg
Maize 15-20
Pine 20-25
Potato 4-6
Rape 2-4
Spinach 5-10
Tobacco 20-25
Wheat 25-30
● 准备工作：1. 准备液氮；65℃水浴；无水乙醇；1.5ml灭菌离心管。
2. 按照标签所示在缓冲液AP3和漂洗液PW中加入无水乙醇，混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3. 每次使用前请检查缓冲液AP1，缓冲液AP2和缓冲液AP3是否有沉淀生成，如果出现沉淀，37℃温浴至沉淀溶解后再使用。
● 操作步骤：如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1. 取适量植物新鲜组织500mg-1g加入液氮充分研磨，取约100mg粉末置于1.5ml离心管中，加入400 μl 缓冲液AP1和6 μl RNaseA (10mg/ml)，漩涡震荡1分钟。
2. 将离心管放在65℃水浴10分钟，水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
3. 加入130 μl 缓冲液AP2，颠倒混匀，冰浴5分钟。
4. 12,000rpm离心5分钟。
注：此步骤离心去除去垢剂，蛋白以及多糖等杂质。
5. 取上清（通常为400 μl）转移到过滤柱CF中，12,000rpm 离心1分钟。
6. 将滤出液转移到1.5 ml离心管中，加入1.5倍体积（例如400 μl的上清液加600 μl缓冲液AP3）缓冲液AP3（使用前请注意是否已经加入无水乙醇），立即颠倒混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
7．吸取步骤6中的混合液加入到吸附柱CG中（吸附柱放入收集管中），12,000 rpm离心1分钟，倒掉废液，吸附柱CG放回收集管中。
注：离心吸附柱的最大容积是700μl，如果一次不能完全上柱，可以分次上柱离心，保证全部溶液全部加到离心柱中。
8．向吸附柱CG中加入500 μl漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm离心1分钟，倒掉废液，吸附柱CG放入收集管中。
9．重复步骤8。
10. 可选步骤：如果离心柱的吸附膜上有颜色，向吸附柱CG中加入500 μl无水乙醇，12,000 rpm离心1分钟，倒掉废液，吸附柱CG放入收集管中。
11．将吸附柱CG放回废液收集管中，12,000 rpm离心2分钟。
注：此步骤非常重要，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
12．将吸附柱CG转入一个干净的1.5ml离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100 μl经65℃水浴预热的洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟，12,000 rpm g离心2分钟。
注；1. 洗脱缓冲液体积最好不少于50 μl，体积过小影响回收效率。
2. 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。
13. DNA产物-20℃保存。
● DNA浓度及纯度检测：基因组DNA*(代"片")段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA*(代"片")段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0％琼脂糖凝胶，使用λ/HindIII判断基因组的大小，完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时， OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水洗脱，比值可能偏低，但并不表明DNA纯度不高。


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·动物/细胞基因组DNA提取试剂盒
编号：RFT035
规格：50次|100次
● 储存条件和效期：本试剂盒在室温（25℃左右）干燥条件下，可保存1年；更长时间的保存可置于2–8℃。2–8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，应在使用前置于37℃下溶解沉淀至溶液澄清后再使用。单独包装的蛋白酶K和RNaseA收到后最好按照需要分装成小管，-20℃保存。
● 产品简介：
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，能提取多种细胞/组织中的基因组DNA。离心吸附柱可以高效、专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA*(代"片")段大，纯度高，质量稳定可靠。
使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
● 提取得率：材料 提取量 DNA得量
动物细胞培养液 106–107 cells 5–30 μg
动物组织 30 mg 10–30 μg
● 准备工作：1. 准备55℃和70℃水浴；无水乙醇；1.5ml灭菌离心管。
2. 按照标签所示在去蛋白液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3. 每次使用前请检查缓冲液GA，缓冲液GB和去蛋白液GD是否有沉淀生成，如果出现沉淀，37℃温浴至沉淀溶解后再使用。
● 操作步骤：如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1. 处理材料：a. 培养细胞：贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液（如用PBS缓冲液或类似缓冲液），10,000 g离心1分钟，倒尽上清，加入200 μl缓冲液GA，振荡至彻底悬浮。
b. 组织：取约30mg动物组织（脾组织用量应少于10 mg）加入到事先盛有200μl 缓冲液GA的1.5ml离心管中，用研磨杵彻底将组织研碎。
2. 加入20 μl蛋白酶K (20 mg/ml)溶液。
a. 提取细胞基因组时，加入蛋白酶K混匀后，55℃放置5-10分钟。
b. 提取组织基因组时，加入蛋白酶K混匀后，在55℃放置，直至组织溶解。
注：不同组织裂解时间不同，通常需1-3小时即可完成（鼠尾需要消化过夜）,期间间歇颠倒混匀样品。
3. 加入10 μl RNaseA（10 mg/ml）溶液，混匀后室温放置2分钟。
4. 加入220 μl缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10分钟，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
注：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置一段时间后会消失。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，会影响DNA的纯度和得率，而且可能导致步骤6中离心柱堵塞。
5．加入220 μl 无水乙醇，颠倒混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
注：加入乙醇后会产生絮状沉淀，可用枪头反复抽打1-2次将沉淀弄碎后再上柱。如果絮状物未做处理，容易导致步骤6中离心柱的堵塞。
6．将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CG中（吸附柱放入收集管中），11,000g离心2分钟，倒掉废液，吸附柱CG放回收集管中。
注：如果出现吸附柱堵塞现象，可将离心时间延长到5分钟。
7．向吸附柱CG中加入500 μl去蛋白液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），11,000g离心1分钟，倒掉废液，吸附柱CG放入收集管中。
8．向吸附柱CG中加入700 μl 漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），11,000g离心1分钟，倒掉废液，吸附柱CG放入收集管中。
9．向吸附柱CG中加入500 μl 漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），11,000g离心1分钟，倒掉废液。
10．将吸附柱CG放回废液收集管中，11,000g离心2分钟。
注：此步骤非常重要，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
11．将吸附柱CG转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加100 μl经70℃水浴预热的洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟，11,000g离心2分钟。
注；1. 洗脱缓冲液体积最好不少于100 μl，体积过小影响回收效率。
2. 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。
12. DNA产物-20℃保存。


2×Taq PCR MasterMix(国产,进口)关键词：百奥莱博,RFT095,2×Taq PCR MasterMix


·D2000 DNA ladder（100-2000bp）
编号：RFT013
规格：100次
● 产品简介：
本产品是由6条带状双链DNA条带组成，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。产品中已含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。6条带的大小分别为100，250，500，750，1000，2000bp。其中750bp条带为100ng/5μl，显示加亮带，其余条带浓度50ng/5μl。
● 使用方法：1.取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中（每1mm×1mm加样孔加1μl，如果加样孔宽于5mm，可以适当增加上样量）就行电泳。
2.建议电泳条件：凝胶浓度为1.5-2.0％，凝胶长度5-7cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间15-20
分钟。
3.通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注：如果使用Goldview等染料就行染色，由于灵敏度比EB低，请酌情增加Marker的上样量。
● 注意事项：1.琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2.请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

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