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北京百奥莱博科技有限公司
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特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括金黄色葡萄球菌毒性休克综合征毒素荧光PCR检测试剂盒(TSST-1)多少钱在内的细菌PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:金黄色葡萄球菌毒性休克综合征毒素荧光PCR检测试剂盒(TSST-1)多少钱
编号:SYA038
规格:48次/盒
品牌:百奥莱博
产地:北京
欲咨询购买金黄色葡萄球菌毒性休克综合征毒素荧光PCR检测试剂盒(TSST-1)多少钱,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·裂谷热病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA233
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA494
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、原理
该试剂盒适用于检测气管分泌物试子、肺组织等样本中牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV),用于牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(40T/Kit)
组份 数量 规格
IBRV反应液(IBRV-qPCR MIX) 1管 800μl/管
核酸提取液(DNA Extraction) 2管 1.5ml/管
酶混合物(Enzymes Mix) 1管 40μl/管
阴性对照(NTC) 1管 250μl/管
IBRV阳性对照(IBRV-PTC) 1管 50μl/管
四、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为12个月。
六、样本采集、前处理与DNA提取
6.1 样本采集
病死或扑杀动物,无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品;活动物灭菌棉试子沾取气管分泌物,放入无菌试管中。
6.2 样本前处理:
组织样本:每份组织分别从3个不同的位置称取样本约1g,手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5ml生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5ml灭菌离心管,8000rpm离心2min,取上清液100μl于1.5ml灭菌离心管。
6.3 DNA提取
6.3.1 对于上述处理好的样本加入等体积的核酸提取液(固体标本加入50μl核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mlEP管,-20℃保存;
6.3.2 DNA的提取也可以采用商业化DNA提取试剂盒。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接去4μl加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的制备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(IBRV-qPCR MIN)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 20μl N×20μl
酶混合物 1μl N×1μl
总量 21μl N×21μl
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入21μl荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(IBRV-PTC)4μl,10000rpm瞬时离心10s。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
预变性 1循环 94℃ for 2 min
PCR扩增 40循环 94℃ for 15 sec
55℃ for 30 sec
在55℃延伸时收集荧光信号。报告基因:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判断
(1)阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(IBRV-PTC):均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3结果判定
(1)在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明IBRV核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明IBRV核酸阴性。
(3)如果Ct值>35,判为可以样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行IBRV qPCR检测。如果重复扩增曲线为为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明IBRV核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配制、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
金黄色葡萄球菌毒性休克综合征毒素荧光PCR检测试剂盒(TSST-1)多少钱关键词:金黄色葡萄球菌毒性休克综合征毒素荧光PCR检测试剂盒(TSST-1),SYA038,百奥莱博
·单增李斯特氏菌单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA257
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·SARS病毒(SARS)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA461
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·结核分枝杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA046
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·尼帕病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA772
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
简介
本试剂盒用一对尼帕病毒特异性引物,结合特异性荧光探针,用一步法荧光RT-PCR技术对尼帕病毒 RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中尼帕病毒的探针报告基团为FAM。
二、用途:
本试剂盒适用于检测疑似感染病人的静脉血等标本中的尼帕病毒RNA。可用于尼帕病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
尼帕病毒荧光qRT-PCR反应液(NIPAH-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(NIPAH-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(NIPAH-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1µL N×1µL
总量 15 µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(NIPAH-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(NIPAH-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明NIPAH核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明NIPAH核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行NIPAH qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明NIPAH核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
金黄色葡萄球菌毒性休克综合征毒素荧光PCR检测试剂盒(TSST-1)多少钱关键词:金黄色葡萄球菌毒性休克综合征毒素荧光PCR检测试剂盒(TSST-1),SYA038,百奥莱博
SYA291 羊源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
SYA109 霍乱弧菌霍乱毒素基因(ctxA)/毒素共调菌毛亚单位基因(tcpA)双重荧光PCR检测试剂盒
SYA772 尼帕病毒单重荧光PCR检测试剂盒
FZ055 猪流行性腹泻病毒抗体检测试剂盒 96T/盒
SYA391 禽腺病毒单重荧光PCR检测试剂盒
SYA150 甲型H3N2流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒
FZ086 磺胺二甲基嘧啶快速检测试剂盒 96T/盒
SYA039 金黄色葡萄球菌杀白细胞素(PVL)单重荧光PCR检测试剂盒
SYA494 牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)单重荧光PCR检测试剂盒
SYA191 偏肺病毒/腺病毒双重荧光PCR检测试剂盒
SYA009 产毒副溶血弧菌单重荧光PCR检测试剂盒 Fluorescent PCR detection kit for Vibrio parahaemolyticus
SYA080 肠出血性大肠杆菌(O157)单重荧光PCR检测试剂盒
SYA630 猪伪狂犬病毒抗体ELISA检测试剂盒
SYA231 基孔肯雅病毒单重荧光PCR检测试剂盒
SYA303 鸡源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量)
SYA121 炭疽芽胞杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
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