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-20℃
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4℃四个周;如长期保存,2X Direct PCR Mix 须-20℃;勿反复冻融超过3次。
- 库存:
20
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格:
50T/100T
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
2)H5N1禽流感荧光定量PCR检测试剂盒普通PCR反应流程
3)反应原理
4)PCR循环
5)与荧光定量PCR技术相比较主要缺点。
H5N1禽流感荧光定量PCR检测试剂盒荧光PCR简述
定义:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的变化,通过仪器软件实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,通过Ct值和标准曲线实现对起始模板的定量分析。
荧光PCR检测分为两种方法:荧光探针法和荧光染料法。
荧光探针法检测原理:
荧光PCR如何实现实时监控的呢?
Ø PCR反应体系中加入荧光染料
Ø 所有的定量PCR仪器都有三个共同的组成部分(检测器、激发光源、热循环模块)
Ø 在扩增过程中,荧光信号随着PCR产物的增加而增强
Ø 每个循环结束后,定量PCR仪器通过光学系统记录荧光信号的增加
Ø PCR软件计算出数据,用于实验结果的分析
ARMS检测方法;1个SNP位点设计双管反应,含目的基因检测及内参检测双通道。
H5N1禽流感荧光定量PCR检测试剂盒技术特点:
Ø 准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果一致性大于99%。
Ø 高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
Ø 快速:整个检测流程只需3小时。
Ø 简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
Ø 防污染
Ø 高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
相关产品列表:H5N1禽流感荧光定量PCR检测试剂盒(不含反转录) 规格
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文献和实验【公告】丁香通试用中心:10月免费试用装精选(10月18日有更新)
200ul低吸附盒装吸头 进口TS3000转染试剂 纳米微粒 非脂质体 其他推荐: 单组分TMB显色液 Peroxidase Conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (Min Hu, Ms) 二抗 96通道个人型半自动移液系统 小动物气体麻醉机,大小鼠气体吸入式麻醉机 四通道实时荧光定量PCR检测系统 Tanon-5200化学发光成像系统(包邮) 优质微晶纤维素MCC(进口) 罗恩1-10ml电动移液器 EpiScript逆转录酶 western
待检测基因-Luc/Rluc的重组质粒;2、细胞系选择: 根据实验需要选择细胞株,通常选择转染效率较高的293T细胞或原代细胞等;3、共转染: 将带有Luc/Rluc标记的报告基因和目的基因进行共转染,设置不同的检测时间点,一般为24h/48h;4、外界干预: 转染后,可进行物理/化学/病毒等的相应刺激;5、细胞处理: 采用进口/国产双荧光素酶检测试剂盒依照protocol操作;6、荧光检测: 使用GENios Pro 酶标仪或具有类似检测功能的设备进行荧光强度检测。三、荧光素酶报告基因的优点
前一段时间在百度中搜索,发现多年前写的一个关于荧光定量PCR技术的PPT有很多人看过或引用过,考虑到自己作荧光定量PCR工作已经了五年了,做的实验以及解决的问题远比五年前多了,因此利用过年的时间,写点荧光定量PCR实验中的一些注意事项及感想,无论对错,都是希望对相关的人员有些参考价值。 荧光定量PCR原理等大家都已经很熟了,我就不细说了,主要是写一些有人问过的事,希望写的内容是大家都关心的。 普通PCR与荧光定量PCR技术区别? 简单的讲PCR技术最早是用于扩增一段特异
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