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- KALANG
- 中国大陆
- KL-D1256
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Western Blocking Buffer
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
100ml
封闭液(Western Blot)
规格：100ml英文名：Western Blocking Buffer
WB封闭液采用BSA（Fraction V）为组份，可用于WB 时转移了蛋白样品的NC 膜或PVDF膜非特异性结合位点的封闭。封闭后，可以减少后续的一抗或二抗与膜的非特异性结合，降低背景着色，增强信噪比。
完成转膜后，用WB洗涤液洗涤蛋白膜1-2 分钟，弃去WB 洗涤液，加入适量WB 封闭液，使之能盖住杂交膜，封闭过夜，然后进行一抗孵育等后续操作。
注意事项
1. 本产品属蛋白制剂，室温放置过久易导致蛋白的降解和活性丧失。
2. 反复冻融亦会导致蛋白活性的丧失。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
4. 通常在室温封闭60 分钟即可。如果对于一些抗体，背景非常高，可以在4℃封闭过夜。
储存：4℃，有效期6个月。
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文献和实验我觉得你首先应拿一个别人已经做过western blot证实条带条件好的蛋白样本来做对比，排除你在做western操作过程的问题 再考虑是你的抗体问题或者是你的蛋白样本的问题 qingdaomdbio 考虑一下封闭液有没有问题 llh刘丽华 我又摸了几次条件，延长了转膜时间，结果还不如现在的结果，我换成5%BSA封闭，结果什么也没有，关键是我现在连上面的结果都重复不出来了，我都不知道怎么办了，但是内参每次
zhangyuxianggx 各位western达人，本人在western操作中屡次失败，现有几个问题跟达人们请教一下： 1、我的蛋白是96kDa,选择8%的分离胶有没有问题？ 2、配制浓缩胶我用的是0.5M Tris-HCL(PH=6.8)，但是看到好多配方用的都是1.0MTris-HCL(PH=6.8)，这个有没有什么影响？ 3、转膜是用的300mA,40min，看着转膜后胶很干净，就一直用的这个电流和时间。但是最后膜上总是很乱，背景
封闭及杂交 在做杂交时，个人建议：还是使用杂交袋进行一抗和二抗的孵育，这样节约抗体。 操作开始： 1. 将膜用 TTBS 从下向上浸湿后，移至含有封闭液的平皿中，室温下脱色摇床上摇动封闭 1 h。必要时可先用丽春红染色（2%乙酸，0.5%丽春红的水溶液）观察蛋白条带，再用去离子水和 TTBS 将丽春红洗脱后封闭，如用蛋白 marker 则可省略此步。 2. 将一抗用 PBST 稀释至适当浓度（在 1.5 ml 离心管中）；撕下适当大小的一块儿保鲜膜铺于实验
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