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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT
- 保质期:
12个月
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
500ml
10×电转移缓冲液
规格:500ml编号:KL11091
本产品作为蛋白电泳完毕后,将凝胶上蛋白电转移到PVDF 膜或其它膜上的缓冲液,含有0.25M Tris、1.92M 甘氨酸。本产品不含SDS,客户可根据自身需求,自行添加0.1%的SDS。
使用时按10×电转移缓冲液:甲醇:蒸馏水=1:2:7 的比例配制成1×的工作液,就可以用于电转移实验。
储存:RT,有效期12个月。
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文献和实验过硫酸胺 0.1 g ,加超纯水1.0 mL 溶解后,4 ℃ 保存,保存时间为 1 周。(-20 ℃长期保存) 30% 丙烯酰胺 溶于总体积为 50 mL 的水中,定容至 100 mL。室温保存于棕色瓶。 10× PBS(2L) NaOH 调 pH 值至 7.4,定容至 2 L。保存于室温。 还原型 5×SDS 上样缓冲液 混匀后,分装于 1.5 mL 离心管中,4 ℃ 可保存数周,-20 ℃ 可长期保存。 电泳液缓冲液 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 室温保存,1 次溶液可重复
glycine, 0.04% SDS, 20%甲醇, 两类膜可供选择:硝酸纤维素膜和PVDF膜(正电荷尼龙膜),根据不同需要选择(下表),PVDF膜需要浸泡甲醇中1-2分钟,再孵育于冰冷的电转缓冲液中5分钟,胶也需在冰冷的电转缓冲液中平衡3-5分钟,否则转膜时会导致条带变形。 注:大蛋白和小蛋白的转膜 电转移缓冲液中SDS与甲醇的平衡、蛋白的大小、胶的浓度都会影响转膜效果,如下调整可以增加转膜效率: 大蛋白(大于100 KD) 1.
为pH4.5。 2、室温下边搅拌(磁力搅拌器或电功搅拌器),边缓慢滴加辛酸(25ml/L血清稀释液),滴加完后继续搅拌30min。 3、离心(10000r/min,30min),收集上清夜,弃去沉淀。 4、上清液用多层纱布过滤。 5、按1/10体积加入10×PBS,用5mol/L NaOH调至PH7.4。 6、上清液4℃预冷,计算溶液总体积,在4℃按277g/L加入硫酸铵粉沫(45%饱和度),边加边搅拌,加完后继续搅拌30min。 7、离心(5000r/min,15min)),弃去上清
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