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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20度
- 保质期:
12 months
- 英文名:
One-step TUNEL In Situ Apoptosis Kit (Green, FITC)
- 库存:
900
- 供应商:
捷世康
- 规格:
20mg/支
名称: 一步法TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒(绿色,FITC)
检测原理
细胞在发生凋亡时,会激活一些特异性的DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。使得凋亡细胞的DNA被切割成180~200bp片段,在琼脂糖凝胶上通常以180~200bp的阶梯状迁移。TdT酶(脱氧核糖核酸末端转移酶)将标记的dUTP连接到断裂DNA暴露的3'-OH末端,通过在这些末端添加荧光dUTP的方式来标记晚期凋亡细胞,从而可以通过荧光显微镜进行检测。
基本信息
应用类型 细胞凋亡-DNA片段化
检测方法 荧光
样本类型 石蜡切片,冰冻切片,细胞爬片,细胞涂片
检测时间 3 hours
检测仪器 荧光显微镜
荧光 FITC
Ex/Em (nm) 490/520
Channel set FITC
Filter set FITC
自备试剂 4%多聚(E-IR-R113),0.2% Triton X-100(E-IR-R122),PBS(E-IR-R187),ddH2O,含抗荧光淬灭剂的封片液(E-IR-R119),二甲苯,无水乙醇
保存温度 -20°C, shading light
运输条件 冰袋
保质期 12 months
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文献和实验产品名称:Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒英文名称:Annexin V-FITC & PI Apoptosis Detection Kit产品分类:细胞凋亡检测试剂盒[Apoptosis Assay Kit]产品编号:A0001c检验方法:Apoptosis包 装:20T产品说明:Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒 概述产品说明在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V
的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
在胞质中以单体形式存在,发出绿色的荧光。可以在荧光显微镜下,或流式检测。采用488nm激发,其检测波长分别是527nm和590nm。整个实验过程操作简单,只需要30min就可以见到结果。Caspase家族可以检测的分子非常多,也有不少商业的试剂盒可以应用。即使没有相应的试剂盒,只要有相应抗体基本上是可以检测的,具体的方法是参照细胞内蛋白检测的步骤。在细胞凋亡过程中伴随着一系列的形态特征改变,细胞膜的改变是这些特征中较早出现的一种。在凋亡细胞中,细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜的内侧翻转到细胞
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