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文献和实验3次,每次1 min。 (4)梯度酒精脱水(-20℃预冷),空气中干燥。3. 变性: (1)每一个立式染色缸配制40 ml 变性溶液; (2)78℃水浴槽中平衡预热混合液染色缸; (3)78℃孵育8 min; (4) 即移入-20℃预冷70%酒精的染色缸内2 min,再依次移入80%、90%和100%的-20℃预冷酒精内,每缸2 min; (5)空气干燥。4. 杂交: (1)准备探针; (2)取一个较大的湿盒,交叉放置切片; (3)滴10 μl 探针在切片
)。 3、变性: 1)每一个立式染色缸配制40ml变性溶液; 2)78℃水浴槽中平衡预热混合液染色缸; 3)78℃孵育8min; 4) 即移入-20℃预冷70%酒精的染色缸内2min,再依次移入80%、90%和100%的-20℃预冷酒精内,每缸2min; 5)空气干燥。 4、杂交: 1)准备探针; 2)取一个较大的湿盒,交叉放置切片; 3)滴10μl探针在切片的组织上,加盖玻片; 4)盖上湿盒盖,37℃孵育12h~16h。 杂交后的水洗: 5)镊子小心
液; 蒸馏水; 水浴锅; 立式染缸; 定时器或时针; 温度计; 镊子及纱布; 刻字笔; 3、操作程序: (1)消化液配制:取0.9%氯化钠注射水100ml,加0.25%胰蛋白酶1ml,制成0.025%胰蛋白酶盐水消化液,加4-5滴tris液调PH6.8左右,移消化液于立式染色缸并置37℃水浴锅中备用;
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