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- 文献和实验
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- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
500U
Calf Intestinal Alkaline Phosphatase(CIAP)牛小肠碱性磷酸酶与E.coli 来源的酶同样,催化所有磷酸单酯的水解,不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水 解,对ATP等的焦磷酸键水解速度较慢。由于 CIAP 处理后的 DNA 片段缺少连接 酶所要求的5′磷酸末端,因此它们不能进行自连接。这个特性可以在克隆时降低载 体DNA 的背景。本产品主要用于去除载体 DNA 片段的 5′-末端的磷酸基;防止 克隆载体的自连接; 蛋白质丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的去磷酸化; 为 5' 末端标记 准备模板。
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文献和实验1 溶解核酸酶P1(sigma)的冷冻干燥物与1.0ml30mM醋酸缓冲液(PH=5.3)?不知道此配法行不行?在sigma的说明书上没有具体说明! 酶活性:1mg核酸酶P1在1小时,ph5.3 ,T=50 能够把2gRNA或0.2gDNA酶解为5-单核甘酸 促进此酶的稳定性:在孵育时,可加zn和人血清白蛋白增加其稳定性! 2牛小肠碱性磷酸酶 试剂准备 • 10mM Tris-HCl (pH 8.0) • CIAP stop buffer 10mM Tris-HCl (pH
一、实验目的 1.掌握酶分离纯化的一般步骤及相关原理; 2.悉碱性磷酸酶的分离纯化的方法步骤。 二、实验原理 有机溶剂分级沉淀是分离蛋白质的常用方法之一。有机溶剂能使许多溶于水的酌生物大分子发生沉淀,其主要作用是降低水溶液的介电常数。例如20℃时水的介电常数为80,82%的乙醇溶液的介电常数为40。溶液的介电常数降低意味着溶质分子间异性电荷库仑引力增加,从而使溶质的溶解度降低
高。如果有相同的抗原决定簇时,则会有交叉反应。方法成熟,使用广泛的还是经典的组织化学方法。下面以碱性磷酸酶的显示方法来学习经典酶组织化学的理论及操作。经典酶组织化学不是显示酶本身,常采用的方法是:在一定条件下,使细胞中的酶作用于酶的底物,使其产物在原地进行捕捉、沉淀转化为有色产物。碱性磷酸酶(AKP)的显示方法最早由Gomeri(1939)提出,现在这种方法称为Gomeri法。碱性磷酸酶是指磷酸单酯酶Ⅰ,它能在pH8.6~10.0的最适条件下分解磷酸单酯,对于与磷酸相接的醇基没有特异性,Gomeri法
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