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低温运输,4℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Phosphatase Alkaline(Calf Intestine)
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
1 mg
别名:CIP;CLAP;Phosphatase Alkaline from calf intestine;碱性磷酸 酯酶。 碱性磷酸酶能催化除去DNA、RNA、三磷 酸核糖核苷和三磷酸脱氧核糖核苷的5′ 磷酸基团。由于CIP处理后的DNA片段缺 少连接酶所要求的5′磷酸末端,因此它 们不能进行自连接。这个特性可以在克隆 时降低载体DNA的背景。 活力:~4500u/mg 用途:生化研究。切除DNA, RNA, rNTPs 及dNTPs的5′末端磷酸基团;防止克隆 载体的自环化连接;蛋白质丝氨酸、苏氨 酸、酪氨酸残基的去磷酸化。
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文献和实验1 溶解核酸酶P1(sigma)的冷冻干燥物与1.0ml30mM醋酸缓冲液(PH=5.3)?不知道此配法行不行?在sigma的说明书上没有具体说明! 酶活性:1mg核酸酶P1在1小时,ph5.3 ,T=50 能够把2gRNA或0.2gDNA酶解为5-单核甘酸 促进此酶的稳定性:在孵育时,可加zn和人血清白蛋白增加其稳定性! 2牛小肠碱性磷酸酶 试剂准备 • 10mM Tris-HCl (pH 8.0) • CIAP stop buffer 10mM Tris-HCl (pH
一、实验目的 1.掌握酶分离纯化的一般步骤及相关原理; 2.悉碱性磷酸酶的分离纯化的方法步骤。 二、实验原理 有机溶剂分级沉淀是分离蛋白质的常用方法之一。有机溶剂能使许多溶于水的酌生物大分子发生沉淀,其主要作用是降低水溶液的介电常数。例如20℃时水的介电常数为80,82%的乙醇溶液的介电常数为40。溶液的介电常数降低意味着溶质分子间异性电荷库仑引力增加,从而使溶质的溶解度降低
高。如果有相同的抗原决定簇时,则会有交叉反应。方法成熟,使用广泛的还是经典的组织化学方法。下面以碱性磷酸酶的显示方法来学习经典酶组织化学的理论及操作。经典酶组织化学不是显示酶本身,常采用的方法是:在一定条件下,使细胞中的酶作用于酶的底物,使其产物在原地进行捕捉、沉淀转化为有色产物。碱性磷酸酶(AKP)的显示方法最早由Gomeri(1939)提出,现在这种方法称为Gomeri法。碱性磷酸酶是指磷酸单酯酶Ⅰ,它能在pH8.6~10.0的最适条件下分解磷酸单酯,对于与磷酸相接的醇基没有特异性,Gomeri法
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