Ad-GFP-LC3B 细胞凋亡与增殖

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括Ad-GFP-LC3B 细胞凋亡与增殖在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：Ad-GFP-LC3B 细胞凋亡与增殖
品牌：百奥莱博
规格：1ml|10×1ml
英文名：Adenovirus expressing GFP-LC3B fusion protein
本品是一种可以表达GFP-LC3B融合蛋白的腺病毒，可以用于感染细胞或组织后进行细胞自噬(autophagy)的检测。

LC3是酵母自噬关键蛋白ATG8在哺乳动物中的同源蛋白。LC3最初被分析鉴定为microtubule-associated protein 1 light chain 3 。LC3蛋白家族包括LC3A、B、C和GABARAP等亚家族，其中对于LC3B的研究最为广泛。到目前为止，LC3B被认为是细胞自噬信号通路最为关键的标志性蛋白。LC3B是一个具有125个氨基酸残基的蛋白，在蛋白合成后，被Atg4所酶切而失去了C端的22个氨基酸蛋白，从而暴露出C端的甘氨酸，人们把它命名为胞质形式的LC3B I。在细胞自噬的过程中，其C端暴露的甘氨酸经过一个类似泛素化的过程，以ATG7为E1样激活酶， 以ATG3为E2样连接酶，以Atg12-Atg5-Atg16复合物为E3样连接酶，在C端甘氨酸上共价连接上磷脂酰乙醇胺而成为LC3B-PE即LC3B II。与胞质定位的LC3B I不同，LC3B II定位于自噬体的内膜和外膜上。在自噬体与溶酶体融合后，自噬体外膜上的LC3B II被Atg4所酶切，而自噬体内膜上的LC3B II则被溶酶体内的蛋白酶所降解。尽管LC3B II比LC3B I的分子量要大，但由于其极强的疏水性，在SDS-PAGE电泳时，LC3B II比LC3B I迁移得更快，其表观分子量分别为14kD和16kD。在用GFP-LC3B腺病毒感染细胞后，在非自噬的情况下，荧光显微镜下GFP-LC3B以弥散的形式存在于细胞质中；而在自噬的情况下，荧光显微镜下GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上，以斑点的形式表现出来。

自噬是一种在进化上高度保守的通过溶酶体吞噬并降解部分自身组分的细胞内分解代谢途径。自噬与多种生理功能有关，在饥饿等不利的环境条件下， 细胞通过自噬降解多余或异常的细胞内组分，为细胞的生存提供能量及原材料，促进生物体的生长发育、细胞分化及对环境变化产生应答。自噬异常与多种病理过程如肿瘤、神经退行性疾病、代谢疾病、病原体感染等都有密切关系。由于细胞自噬在生理和病理过程中都有重要作用，自噬已经成为细胞生物学领域的一个新的研究热点。

Ad-GFP-LC3B是百奥莱博的重组腺病毒，感染后能够在靶细胞中有效表达绿色荧光蛋白(GFP)和LC3B的融合蛋白，呈现明亮的绿色荧光，可以用于细胞自噬的检测。

腺病毒感染细胞后为瞬时表达，通常不会与基因组DNA重组，不能用于筛选稳定细胞株。本产品感染体内外细胞后，有效表达时间通常不少于7天，不同细胞和组织的有效表达时间有所不同。感染10-14天后融合蛋白的表达很可能会大大减弱。

百奥莱博的Ad-GFP-LC3B采用了成熟的E1缺陷型重组腺病毒载体系统，感染普通的细胞后不能进行扩增和重组，从而可以有效降低本产品在活体生物中的风险。

本产品可以在表达E1的HEK293A、HEK293等适当细胞中扩增。

本产品的滴度≥1×108 pfu/ml，使用时可以按照108pfu/ml进行计算。如果按照20 MOI感染6孔板的细胞，每孔50万细胞计算，共可以感染10个孔；如果按照20 MOI感染24孔板的细胞，每孔10万细胞计算，共可以感染50个孔。如果MOI值提高，则相应可以感染的孔数会减少；如果MOI值降低，则相应可以感染的孔数会增加。

注意事项：
1. 反复冻融会降低病毒滴度，如有必要请在收到本产品后分装保存。病毒融解后，如果在一周内使用，可以放置于4℃。如果-80℃保存时间超过一年，可能会导致滴度下降，此时建议重新测定病毒滴度。
2. 腺病毒感染需要细胞表面的CAR受体，请确认拟使用的细胞或组织可以被腺病毒感染。
3. 本产品使用前请仔细阅读附录1《腺病毒使用安全规范》。本产品生物安全等级为Biosafety Level 1 (BSL-1)，没有确凿证据显示会导致健康成人产生疾病，可以按照常规的微生物实验操作要求进行操作。

储存条件：-20℃，有效期1～2个月。

欲咨询购买Ad-GFP-LC3B 细胞凋亡与增殖，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·磷酸化Chk2(Thr68位点)抗体
编号：YT663
英文名称：anti-Phospho-Chk2(Thr68) antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成的含磷酸化Thr68的一段人Chk2多肽进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本Phospho-Chk2(Thr68)抗体识别Thr68被磷酸化的Chk2，不识别未磷酸化或其它位点被磷酸的Chk2 。

Chk2是一个细胞周期检控点激酶(checkpoint kinase)，其氨基末端区含7个丝氨酸和苏氨酸残基包括Ser19,Thr26、Ser28、Ser33、Ser35、Ser50和Thr68，每个残基后面带有一谷氨酸(SQ或TQ模式)。这些位点是ATM/ATR激酶的常见磷酸化位点。在紫外照射、离子辐射等DNA损伤诱导条件下，Chk2的Thr68等位点会被ATM/ATR所磷酸化。Chk2的Thr68磷酸化后可以促进Chk2寡聚体的形成，寡聚化后会导致Chk2的Thr383和Thr387的自身磷酸化。Chk2的自身磷酸化是激活其下游信号通路所必需的。

组份：
Phospho-Chk2(Thr68)抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

免疫原种属：人
免疫原：人工合成的含磷酸化Thr68的一段人Chk2多肽
宿主：兔
用途：WB,IF
交叉反应性：人
同种型：IgG
Chk2分子量：～62kD
推荐稀释比例：WB(1:1000),IF(1:50)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。

储存条件：-20℃，有效期一年。


Ad-GFP-LC3B 细胞凋亡与增殖关键词：YT159,Ad-GFP-LC3B,Adenovirus expressing GFP-LC3B fusion protein


·SDS裂解液
编号：YT039
英文名称：SDS Lysis Buffer
规格：100ml
本品是一种比较强烈的细胞组织裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、ChIP(染色质免疫共沉淀，chromatin immunoprecipitation)等。

SDS裂解液的主要成分为50mM Tris (pH8.1)，1% SDS，以及sodium pyrophosphate，β-glycerophosphate，sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。

用SDS裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用百奥莱博的BCA蛋白浓度测定试剂盒(YT036/YT037)测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。

·超灵敏ECL化学发光试剂盒
编号：YT061
英文名称：Ultra sensitive ECL chemiluminescence Kit
规格：共100ml
本Western萤光检测试剂是一种特超敏ECL化学发光试剂盒，发光效果显著优于YT060高灵敏ECL化学发光试剂盒，可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶发生化学反应，发出萤光，从而可以通过用X光片压片或其它适当萤光成像设备检测样品。

本试剂盒灵敏度极高，比DAB显色的灵敏度至少高1000倍，比原Pierce公司(现Thermo公司)的SuperSignal West Pico Substrate的灵敏度高10倍以上，实际检测效果与原Pierce公司的SuperSignal West Dura和SuperSignal West Femto的检测灵敏度相近。对于辣根过氧化物酶的最低检测灵敏度可以达到飞克级，500飞克辣根过氧化物酶用本试剂盒检测并用化学发光仪进行发光强度的定量检测时，信噪比大于5。

本试剂盒系统发光时间更长。在10微升1-10纳克/微升辣根过氧化物酶标记IgG中，加入100微升本试剂盒工作液后在不同时间点通过化学发光仪检测化学发光。检测数据显示20分钟后发光无明显减弱， 60分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约85%左右，120分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约70%左右。


检测不同剂量HRP-IgG，20分钟后发光效果几乎不变，120分钟后发光效果仍然良好。

本试剂盒系统的高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量。同时必须注意适当减少一抗和二抗或样品的用量，以免获得过深的难以比较灰度的条带。本试剂盒系统稳定性较好，37℃水浴孵育30天，和4℃保存的试剂相比，对相同样品的检测效果无任何明显差异。此外本试剂盒系统背景很低，对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。

储存条件：4℃避光，有效期一年。


Ad-GFP-LC3B 细胞凋亡与增殖关键词：YT159,Ad-GFP-LC3B,Adenovirus expressing GFP-LC3B fusion protein


·核酸酶清除剂(核酸酶喷雾清除剂)
编号：YT400
英文名称：RNase and DNase Away
规格：250ml
本品是一种高效清除实验仪器、设备、材料固相表面的RNase和DNase等核酸酶污染的无毒无腐蚀性喷洒型试剂，主要用于创造洁净的DNA和RNA操作环境。

本产品能有效清除RNase和DNase，并且不会直接影响RNA和DNA的稳定性，对RNA酶的清除效果与进口品牌的清除剂清楚效果基本一致，对于DNase的清除效果显著优于进口清除剂，对于DNA的稳定作用也优于进口品牌。

本产品使用安全，无毒性、无腐蚀性，也无刺激性，在某些用途方面是一种非常安全的DEPC替代品。

本产品使用便捷。使用时直接将本产品均匀喷洒于固体表面，约5分钟后用洁净纸巾擦拭干净即可进行后续的实验操作。本产品适用于实验仪器设备如PCR仪、离心机、移液器、实验台、试管架、离心管架、电泳槽等，及实验耗材如离心管、枪头、手套等表面核酸酶污染的清除，对于塑料制品、乳胶制品、玻璃制品、不锈钢制品均有效。

本产品对RNA和DNA都无影响，极微量的本产品残留也不会明显影响下游实验。

注意事项：
1）本产品每次使用后应当拧紧喷头，保证本产品的密闭保存，避免长时间接触空气，以免影响使用效果。
2）使用本产品清除实验器材等表面的核酸酶污染后，仍需注意戴手套、口罩等进行操作，以免工作环境和样品被污染。
3）本产品用于仪器设备时，仅限于仪器设备表面可以擦拭清洗的地方，严禁本产品流入仪器设备内部，以免影响或破坏仪器设备的正常运行。

储存条件：室温密封，有效期一年。

·JAK抑制剂(AG 490)
编号：YT316
英文名称：Tyrphostin AG 490
规格：5mg
本品是一种可以通透细胞膜的JAK-2蛋白酪氨酸激酶抑制剂，对其他激酶如Lck, Lyn, Btk, Syk or Src活性无明显影响。可以抑制白介素2诱导的细胞分裂并诱导一些肿瘤细胞的凋亡；能选择性地抑制CDK2的激活，导致细胞周期停滞在G1晚期和S期；可阻断IL-7诱导的T细胞中JAK-1和JAK-3激活，以及后续PI-3 kinase的磷酸化；可以抑制EGF受体的自身磷酸化，抑制DNA合成和细胞增殖。AG 490是研究细胞信号转导过程中JAK的功能和作用的常用试剂。AG 490不溶于水，可溶于DMSO(溶解度可达100mg/ml)、丙酮，微溶于无水乙醇(溶解度可达5mg/ml)。

CAS：133550-30-8
分子式：C17H14N2O3
分子量：294.30
纯度：＞98%。

储存条件：-20℃避光。

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