细胞增殖试剂WST-1

细胞增殖试剂WST-1

一般描述

用于细胞增殖、活力和毒性非放射性定量分析的一种比色检测（基于WST-1）。
内含物
即用型溶液，含有WST-1以及电子偶联试剂。
细胞的增殖需要基因组DNA的复制。因此，监测DNA合成是细胞增殖的一种间接参数，而适用于对DNA合成调控的研究。[³H]-胸苷一直以来用于对复制（循环）中的细胞DNA进行标记。为了克服与使用[³H]-胸苷相关的缺点，一种基于5-溴-2′-脱氧尿苷（BrdU）的非放射性替代物已被开发。化学发光技术的使用提供了增强的灵敏度和宽泛的测量范围。

应用

细胞增殖试剂WST-1用于以96孔板的形式对细胞群中细胞的增殖和活力进行非放射性的光谱定量。测量对生长因子、细胞因子、分裂素和营养素而作出响应的细胞增殖

• 细胞毒性和细胞抑制化合物，如抗癌药物和其他药物化合物的分析
• 生长抑制性抗体和生理性调节因子的评估

特点和优势

• 便捷：来自即用型试剂的优势。
• 安全且简单：免去了放射性同位素、洗涤步骤以及额外的试剂。
• 准确：所获得的吸光值与细胞数量紧密相关。
• 灵敏：可检测低细胞数量。
• 快速：使用多孔ELISA读板器处理大量的样品。

原理

WST-1这种稳定的四唑盐可通过一种主要发生在细胞表面的复杂细胞机制而被切割成可溶性的甲臜。这种生物性还原主要依赖于活细胞中NAD(P)H的糖酵解生成。因此，所形成的甲臜染料的量与培养体系内具备代谢活性的细胞数量直接相关。
培养于96孔组织培养板中的细胞与WST-1试剂一同孵育0.5 - 4小时。在完成孵育后，可使用扫描型的多孔分光光度计（ELISA读板器）对所形成的甲臜染料进行定量。所测量的吸光值与活细胞的数量直接相关。
细胞增殖及活力检测是细胞生物学中具有特别重要性的常规应用。四唑盐（如MTT, XTT, WST-1）对于该类型分析特别有用。四唑盐被琥珀酸-四唑蓝还原酶系统（EC 1.3.99.1）切除成甲臜，而该系统属于线粒体的呼吸链并仅在代谢性完整的细胞中具有活性。