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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Klenow Fragment (3´→ 5´ exo-
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
200U
Klenow 片段(3´→5´exo- )是大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 的蛋白水解产物。它保留 了DNA 聚合酶活性,但失去了 5´→3´ 外切核酸酶活性。该酶经突变(D424A)去 除了其 3´→5´ 的外切核酸酶活性。 具体有下列特点:
1. 用随机引物制备探针
2. 随机引物标记法
3. 合成 cDNA 第二链
4. 诱变反应中第二链的合成
5. 双脱氧法 DNA 序列测定(Sanger 法)
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文献和实验Buffer/tube and incubate 10' @ 70oC. 6. Add: 2.0ml 10X Klenow Mix +2.0ml 0.125mM dNTPs +0.5ml Klenow Incubate 10' @ 37℃. 7. Analyze 10ml on a gel. To the remainder in each tube, add 40ml Ligation Mix + 1ml T4 DNA Ligase. Incubate overnight @ 15℃
断裂。原位末端标记(in situ end labeling,ISEL)是将掺入到凋亡细胞中的外源性核苷酸,在酶如末端脱氧核苷酸转移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TDT)、DNA聚合酶I或Klenow大片段等的催化下,与凋亡细胞单股或双股DNA断链相结合,再通过一定的显示系统使之显示出来。比较常用的有两种方法:末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUT
10 X Klenow Buffer 0.5 M Tris 7.5 500 ml 1 M Tris 7.5 0.1 M MgCl2 100 ml 1 M MgCl2 10 mM DTT 100 ml 0.1 M DTT 0.5 mg/ml BSA 50 ml 10 mg/ml BSA 250 ml Q store at -20° in 50 ml aliquotes dNTP Mix
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