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- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
一年
- 英文名:
b-Mercaptoethanol,EG
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
1.5 mL
本产品是电泳级的b-巯基乙醇原液,专门 用于SDS-PAGE蛋白质变性电泳。在过 量b-巯基乙醇存在时(一般为5%),它 能够打开蛋白质的二硫键,使蛋白质的在 SDS-PAGE胶中的泳动速度只取决于分 子大小。如果没有足够的b-巯基乙醇,具 有二硫键的蛋白质在SDS-PAGE电泳中 的分辨率将会出现鬼带。本产品可以用于 制备SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE 上样液,也可以用于补充上样液中挥发的 巯基乙醇。
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文献和实验SDS-PAGE,蛋白转印,western Blot试剂配制
溴酚蓝(BPB)50% (V/V) 甘油5% (W/V) β-巯基乙醇(2-ME)配制量 5 ml配制方法1.称量下列试剂置于10ml 塑料离心管中。1 M Tris•Cl (pH 6.8) 1.25 mlSDS (电泳级) 0.5 g溴酚蓝(BPB) 25 mg甘油 2.5 ml2.加去离子水溶解后定容至5 ml。3.小份(500 ul/份)分装后于室温保存。4.使用前将25 ul的2-ME加到每小份中。5.加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右。 1 mol/L
。 d. 立刻接操作步骤项下3。 2. 液氮研磨法: a. 取500μl裂解液RLT(已经加入β-巯基乙醇),转入1.5ml离心管中,加入50μl PLANTaid混匀备用。 b. 液氮中研磨适量植物组织成细粉后,取50mg细粉转入上述装有RLT和PLANTaid的离心管, 立即用手剧烈振荡20秒,充分裂解。 在56℃温育1-3分钟有助于裂解植物,但是淀粉含量高的植物不能温育,因为提高的温度可能导致淀粉膨胀。 c. 用带钝针头的一次性 1 ml(配0.9mm针头) 注射器抽打
1. 液氮研磨1g左右的植物组织,转移到离心管中。改用研磨枪在冰上研磨,不加β-巯基乙醇 研磨时可加入适量的PVP、β-巯基乙醇。若CTAB准备2-3天内用完,则可将PVP、β-巯基乙醇直接加入其中。 2. 加入500µl的2*CTAB (60℃或65℃预热) ,颠倒混合均匀后在60℃或65℃水浴30m-1h小时,其间要上下颠倒混匀数次。 3.取出离心管,加入
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