Caspase 4检测试剂盒

Caspase 4检测试剂盒产品及特点
Caspase（Cysteine-requiring Aspartate Protease）家族在介导细胞凋亡的 过程中起着非常重要的作用，其中Caspase 4可以和Apaf-1相互作用并参与细胞色素 C导致的Caspase 3激活。Caspase 4也可以和caspase 14相互作用。本产品是基于 底物Ac-LEVD-pNA(acetyl-Leu-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)的Caspase 4分光光 度法检测试剂盒，可用于检测细胞或组织裂解液中Caspase 4活性或纯化的Caspase 4活性。
本产品具有下列特点：
1. 即开即用，不需要花时间准备各种成分，操作简便、快捷、安全，灵敏度高。
2. 适用于培养细胞、新鲜组织等样品的Caspase 4检测。
3. 某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖Caspase 4的机制，此时建议检 测其他凋亡信号通路。
4. 与各类型分光光度计和酶标仪兼容，用酶标仪检测或容量不超过100 μL的分光光 度检测杯检测时，除标准曲线外可以检测20个样品。
5. pNA溶液(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁 或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
Caspase 4检测试剂盒使用及效果
裂解样品：
1. 细胞样品 收集3-5×106 个细胞，向细胞中加入150-200 μL预冷的溶液A（裂 解液），冰上静置20-60 min，期间振荡3-4次。4℃，10000 rpm离心1分钟。转移 上清至新离心管，取少量上清测定蛋白浓度（Bradford法）。
2. 组织样品 取3-10 mg组织样品，剪碎至3mm×3mm大小，加入100-150 μL预冷的溶液A，匀浆器匀浆。匀浆液转移至预冷的离心管中，4℃，10000rpm离 心5分钟。转移上清至新离心管，取少量上清测定蛋白浓度（Bradford法）。 Caspase 4检测 取10 μL 含100-200 μg蛋白的细胞或组织裂解液上清，体积不足10 μL的，溶液 A补足体积至10 μL。加80 μL溶液B。加入10 μL溶液C，混匀，注意避免在混匀时产 生气泡，37℃避光孵育4小时。酶标仪或分光光度计405nm测定吸光值。根据pNA标 准曲线计算样品催化产品的是pNA量。