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- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY81109A-20
- 2025年07月09日
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- 保存条件：
常温运输及保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Yeast Chemical Competent Cell Preparation Kit
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
20次
本酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理，高效快速制备酵母化学 感受态细胞，用于长期冻存以备后续转化的产品，它具有下列特点：
1. 一次制备，-80℃保存，多次使用。
2. 操作简单，单溶液制备，除酵母培养的时间外，整个操作只需要10分钟。
3. 试剂盒含高效转化液，即开即用。
4. 得到的感受态细胞的最高转化效率在0.2-1×105 个转化子/ μg质粒DNA。
5. 适用于各种实验用酵母菌株，包括S. cerevisiae、C. albicans、S. pombe、 Pichia pastoris等。也可用于携带有选择性质粒的酵母。
6. 得到的感受态细胞可即刻转化各种线性或环状酵母穿梭质粒，例如YIp，YRp， YCp，YEp和YAC等。
7. 可以用于定点突变（Site－Directed Mutagenesis）、基因破坏（Gene Disruption）、等位突变基因修复（Mutant Allele Recovery）、酵母双杂交 系统等实验。
酵母化学感受态细胞制备试剂盒使用及效果
将一个酵母菌落接种到10 mL的YPAD培养基中，30℃摇晃培养直到OD600 达到0.6-1.0，离心弃上清后再用5 mL工作液(5 mL溶液A+0.25 mL溶液B，混匀 后即得工作液)洗涤，再用0.2 mL工作液将菌体重悬，然后按每管0.1 mL分装， 放-80℃保存。
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文献和实验1、毕氏酵母氯化锂转化法（1）试剂1M LiCl（用去离子蒸馏水配制，滤膜过滤除菌；必要时用消毒去离子水稀释）50% PEG3350（Sigma P3640 用去离子蒸馏水配制，滤膜过滤除菌，用较紧的盖子的瓶子分装）2mg/ml salmon sperm DNA / TE（10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA）-20℃保存注：醋酸锂对毕氏酵母无效，仅氯化锂有效；PEG3350可屏蔽高浓度LiCl的毒害作用；（2）感受态毕氏酵母的制备接种Pachia pastoris
相关专题 1、毕氏酵母氯化锂转化法 (1)试剂 1M LiCl(用去离子蒸馏水配制，滤膜过滤除菌;必要时用消毒去离子水 稀释) 50% PEG3350(Sigma P3640 用去离子蒸馏水配制，滤膜过滤除菌，用较紧的盖子的瓶子分装) 2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA )-20℃保存
★ PEG is a minimal requirement for the binding of DNA to yeast cell surfaces ★ Li + only has an effect on yeast cell wall instead of the cell membrane Effect of PEG and Li + on yeast
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