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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Proteinase K Solution
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
1.5 mL
本产品是浓度为10 mg/mL的蛋白酶K溶 液,可以直接加入到各种溶液中降解其中 的蛋白质。可以用于核酸纯化、原位杂 交、DNA脉冲电泳和蛋白指纹图谱分析等 实验。
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文献和实验,此时可见白色絮状沉淀,此即DNA粗制品。 5.用玻棒捞起DNA沉淀,放入小烧杯中,用70%乙醇洗涤沉淀一次,洗涤时动作要轻,防止DNA被切断。 6.沉淀取出放入一干净的塑料离心管中,用lmlTE缓冲液溶解。 7.在lmlDNA溶液中加入10mg/ml的RNA酶20μl,使最终浓度达到200μg/ml,37℃保温30分钟。 8.加入20%SDS25μl,使最终浓度至0.5%;加入0.5mol/l EDTA30μl至20mmol/l;加10mg/ml蛋白酶K20μl,使最终浓度为200μg/ml,50
%,70%,50%,30%各5min。入PBS(含5mmol/l MgCl 2 ,pH7.3~7.4)10min×2。入0.2n HCl 20min以进一步去除蛋白。 (3)50℃2×SSC,含5mmol/l EDTA溶液中30min。 (4)蛋白酶K(1μg/ml溶于0.1mol/l PBS中,)37℃20~25min。 (5)0.2mol/l 甘氨酸液:室温10min,中止蛋白酶反应。 (6)4%多聚甲醛(PBS新鲜配制):室温20
NaCl、10mmol/l Tris-HCl(pH8.0)、1mmol/L EDTA(pH8.0)],先少量,充分混匀,然后加10mg/ml蛋白酶K100μl,20%SDS30μl,摇匀,置37℃水浴15~20h。 (5)用等体积饱和酚抽提,3000rpm离心5min。 (6)用大口钝缘吸管小心吸取上层水相,加饱和酚和氯仿-异戊醇(24:1)抽提,3000rpm离心5min 。 (7)小心吸取上层水相,用等体积氯仿-异戊醇(24:1),抽提,3000rpm离心5min
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