- ¥190 - 1980
- KALANG
- 中国大陆
- KL4501
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2～8℃
- 保质期：
长期
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
50次×50μl|100次×50μl
THERMOscript One Step RT-PCR Kit(一步法耐热反转录PCR试剂盒)
产品说明：本试剂盒是专为一步法RT-PCR 实验配制的，使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录反应和PCR 扩增反应。反应过程中无需打开管盖添加试剂，避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包括多点突变改造耐热M-MuLV H Minus 逆转录酶、热启动HotMaster Taq DNA 聚合酶和RNasin 抑制剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR 扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H 活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA 合成以及高比例的全长cDNA 文库的构建等。同时该酶可以在高达50-60℃反转录，大大提高了复杂二级结构，GC 含量丰富模板反转录效率，产量敏感度和特异性比一般试剂盒显著特高。
储存：－20℃ 保存，有效期6 个月。
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文献和实验随机引物 适用于长的或具有发卡结构的 RNA。适用于 rRNA、mRNA、tRNA 等所有 RNA 的反转录反应。主要用于单一模板的 RT-PCR 反应。 Oligo dT 适用于具有 PolyA 尾巴的 RNA。（原核生物的 RNA、真核生物的 Oligo dT rRNA 和 tRNA 不具PolyA 尾 巴。）由于 Oligo dT 要结合到 PolyA 尾巴上，所以对 RNA 样品的质量要求较高，即使有少量降解也 会使全长 cDNA 合成量大大减少。 基因特异性引物 与模板序列互补
Two-Step RT-PCR protocol We will provide both one-step and two-step protocols for RT -PCR . We recommend the two-step protocol for this class. In the one-step protocol, the components of RT and PCR are mixed in a single tube
SuperScriptⅡ的逆转录反应中加入乙酰化BSA可以增加灵敏度（图8），而且对于小量RNA，减少SuperScriptⅡ的量并加入40单位的RnaseOut核酸酶抑制剂可以提高检测的水平。如果在RNA分离过程中使用了糖元，仍然建议在使用SuperScriptⅡ进行逆转录反应时加入BSA或RNase抑制剂。 图9 一步法RT-PCR的灵敏度 使用SuperScriptⅡOne-Step RT-PCR System从0，0.1，1，10，102，103pg Hela
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