- ¥490
- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY120679-100
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
二年
- 英文名：
Exo-Resistant Random Primer
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
100 μL
本产品为具有外切酶抗性的随机引物，是 单链随机寡核苷酸混合物，可高效、随机 引发不同DNA的合成反应。本产品含有 2个3’-末端硫代磷酸酯(PTO)修饰，对 校正DNA聚合酶的3’至5’外切核酸酶 有抗性。该引物还含有5’和3’-羟基末 端。本产品浓度为500 μM，可用于基因 组DNA和质粒的链置换扩增以及随机引发 的DNA标记。
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文献和实验成ATP，然后催化[α-32P]dNTP上的标记磷酸转移至DNA的5’末端，从而使DNA重新磷酸化，并藉此得到标记。显然，PNK标记DNA末端需要[γ-32P]dNTP，这与前述酶促标记方法不同。通常，对于5’磷酸化的DNA探针，要先用碱性磷酸酶去掉磷酸基团，然后再用于PNK催化的5’末端标记，这样标记效率较高。 4．随机引物延伸 这是以单链DNA或RNA模板合成高比活性32P标记探针所选用的方法。原理是使长6～8nt的寡核苷酸片段与变性的DNA或RNA模板退火，在DNA聚合酶I或反转
SDS、EDTA、胍盐、甲酰胺、磷酸钠和亚精胺调整cDNA合成温度或引物设计 信号高于预期在低于预期的循环中即可检出产物 反应中加的样品太多 降低模板的浓度 模板或PCR残余污染 隔离污染来源，更换试剂使用专用的精致移液器。在无DNA区域准备反应，使用抗气溶胶的吸头。电泳后出现意外的条带 RNA被基因组DNA污染 用DNase I预处理RNA 用于第一链合成的寡聚dT或随机引物 使用基因特异性引物 PCR的低特异性 优化PCR条件
。对于＞1kb的RT-PCR产物，保持反应温度≤65℃。注意：不要在高于37℃时使用M-MLV。如果不需要全长cDNA，在第一链反应中使用随机引物。7）引物或模板对残余的RNA模板敏感建议解决方法：在PCR前用RNaseH处理。8）靶序列在分析的组织中不表达建议解决方法：尝试其他靶序列或组织9）PCR没有起作用建议解决方法：对两步法RT-PCR，不要在PCR步骤中使用超过1/5的逆转录反应产物。2.问题：PCR灵敏度：在琼脂糖凝胶分析中看到少量或没有RT-PCR产物。可能原因：1）PCR引物
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