- ¥1290
- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY100847-5
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，10×封堵液和BCIP-NBT浓 缩液需要-20℃保存，AP标记的抗DIG 抗体需要4℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
BCIP-NBT DIG Detection Kit
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
5次
非同位素Southern、Northern杂交是分子生物学的重要技术，广泛用于转基 因检测和其他基因分析。但非同位素Southern、Northern杂交的缺点是步骤多， 灵敏度相对同位素较低，并且不能在中间步骤检测试验效果，只有最后一刻才能知 道实验的成败。为了提高成功率，本公司开发了此款专门用于高效检测DIG标记探 针杂交结果的产品，其最大特点是：
1. 一站式，不需要客户单独准备其中的各个成分。
2. 步骤经过优化，不需要用户花费大量时间优化每个步骤。
3. 检测的灵敏度适中，适用于质粒杂交和菌落杂交。
4. 跟其他天恩泽产品高度兼容，但也可以与其他DIG标记试剂盒配合使用。
5. 非同位素检测，无毒环保。
BCIP-NBT法di高辛杂交检测试剂盒使用及效果
将杂交过夜的杂交膜取出、洗膜、然后用BCIP检测
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文献和实验原位聚合酶链式反应（in situ PCR）和原位反转录聚合酶链式反应（in situ RT-PCR）操作规程
5min ， 42 ℃杂交过夜。 （ 2 ）杂交后用 2×SSC 洗涤 10min ， 3 次， 1×SSC 洗涤 10min ， 3 次； （ 3 ）缓冲液洗涤 10min ， 3 次； （ 4 ）加碱性磷酸酶标记的羊抗地高辛抗体复合物， 37 ℃， 2h ； （ 5 ）缓冲液洗涤 5min ， 3 次； （ 6 ） NBT 、 BCIP 暗处显色，镜下控制，终止显色。 （ 7 ）常规脱水：透明、封固。 2 、原位 RT-PCR 步骤
碱性磷酸酶标记的羊抗地高辛抗体复合物，37℃，2h；e、缓冲液洗涤5min，3次；f、NBT、BCIP暗处显色，镜下控制，终止显色；g、常规脱水：透明、封固。2、原位RT-PCR步骤（1）预处理：a、蛋白酶K（0.3mg/mL） 54℃消化20min，蒸馏水洗；b、95℃加热3min，灭活残存的蛋白酶。（2）原位扩增：a、在有RNA酶抑制剂存在的条件下，用随机六聚物进行逆转录反应；b、用热启动法进行PCR扩增。标本加热至75℃时加上反应液，覆以盖玻片，四周用指甲油密封。然后将温度升至95℃，2min。再将热循环
，1.5min，共25～30个循环，72℃延伸10min； （3）氯仿洗去盖玻片，4％多聚甲醛后固定10min，梯度酒精脱水，干燥。 3、原位杂交： （1）加地高辛标记探针的杂交液，98℃变性10min，-20℃退火5min，42℃杂交过夜。 （2）杂交后用2×SSC洗涤10min，3次，1×SSC洗涤10min，3次； （3）缓冲液洗涤10min，3次； （4）加碱性磷酸酶标记的羊抗地高辛抗体复合物，37℃，2h； （5）缓冲液洗涤5min，3次； （6）NBT、BCIP暗处显色，镜下控制
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