- ¥490
- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY120676-50
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Southern Blocking Buffer (NC)
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
50 mL
本产品为专门针对NC膜的核酸杂交封堵 液，用于降低检测时的非特异性信号，降 低背景，增强信噪比。经过反复优化配 方，即开即用，方便快捷。
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文献和实验大于 109 计数/分/μl。六、杂交Southern 杂交一般采取的是液-固杂交方式，即探针为液相，被杂交 DNA 为固相。杂交发生于一定条件的溶液（杂交液）中并需要一定的温度，可以用杂交瓶或杂交袋并使液体不断的在膜上流动。杂交液可以自制或从公司购买，不同的杂交液配方相差较大，杂交温度也不同。下面给出的为一杂交液配方：PEG 6000 10%；SDS 0.5%；6×SSC；50% 甲酰胺。 该杂交液的杂交温度为 42 ℃。1．预杂交NC 膜浸入 2× SSC 中 5 min，在杂交瓶中加入杂交
2×SSC液中5min,在杂交瓶中加入杂交液(8cm×8cm的膜加5ml即可),根膜的背面贴紧杂交瓶壁,正面朝向杂交液。放入42℃杂交炉中,使杂交体系升到42℃。取经超声粉碎的鲑鱼精DNA (已溶解在水或TE中)100℃加热变性5min,迅速加到杂交瓶中,使其浓度达到100ug/ml。杂交4h。鲑鱼精DNA的作用是封闭NC膜上没有DNA转移的位点,降低杂交背景、提高杂交特异性。 2．杂交 倒出预杂交的杂交液,换上等量新的已升温至42℃的杂交液,同样加入变性的鲑鱼精DNA。将探针
。室温或37℃ 1hr。 4. 加50μl 终止缓冲液终止反应。 标记后的探针可以直接使用或过柱纯化后使用。由于a-32P的半衰期只有14天，所以标记好的探针应尽快使用。探针的比活性最好大于109计数/分/μl 六、杂交 Southern 杂交一般采取的是液-固杂交方式，即探针为液相，被杂交DNA为固相。杂交发生于一定条件的溶液（杂交液）中并需要一定的温度，可以用杂交瓶或杂交袋并使液体不断的在膜上流动。杂交液可以自制或从公司购买，不同的杂交液配方相差较大，杂交温度也不同。下面给出
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