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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输,4℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Magic Solution DNABACK
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
30次/100次
本产品是一管式非醇超快DNA/RNA沉淀剂,其主要特点是:
1. 超快,只需要离心2分钟即可,不需要低温长时间放置,也不需要长时间离心。
2. 回收效果一般在80-90%,比经典的醇沉淀法更高。
3. 既可用于DNA,也可用于RNA。
4. 用途广范,包括去盐、去蛋白、PCR片段纯化、体外转录RNA纯化、核酸浓 缩等。
5. 只需加入核酸溶液1/10体积的沉淀液(溶液A),所以处理量比经典的醇沉淀 法更大,尤其适合于浓缩核酸。
超快非醇核酸沉淀剂使用及效果
核酸溶液中加入1/10体积的溶液A,混匀后室温放置2分钟后13000 g离心 2-5分钟,小心弃上清后加1 mL溶液B,吹打混匀,离心2分钟,弃上清即得回收 的核酸。
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文献和实验细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中PH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械切力作用降解。EDTA的作用:(1)螯合Mg2+ 、Ca2+ 等金属离子,抑制脱氧核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时一定的金属离子作辅基)。(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。2.溶液Ⅱ--NaOH-SDS液:NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。但当pH>12或pHSDS
上的电荷,减少相斥力而互相聚合,后者是因为钠盐与SDS-蛋白复合物作用后,能形成较小的钠盐形式复合物,使沉淀更完全。 4.为什么用无水乙醇沉淀DNA? 用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。 DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相
(酶抑制物残留) 要求很高。 4:彻底匀浆是提高得率和降低降解的关键。 5:检查 RNA 的完整性电泳检测,28S:18S =2:1 是完整的标志,1:1 对大部分实验也是可以接受的。 6:去除 DNA用于 RT-PCR, array analysis 最好用 Dnase I 去除 DNA。 7:降低外源酶的污染 – 不能从外面又导入酶。 8:低浓度的核酸浓缩时,要加入助沉淀试剂。但要防止助沉淀剂含酶及 DNA 污染。 9:彻底溶解 RNA,必要时可以 65C 加热
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