- ¥290 - 550
- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY80912-5
- 2025年07月11日
企业认证
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输及保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Maxi Column Plasmid DNAOUT
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
5次/10次
本试剂盒是用于质粒DNA大量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理， 再通过离心吸附柱，专一结合DNA，最后洗去杂质，高效快速提取质粒DNA套 操作可以在30分钟之内完成。使用本试剂盒可从50-100 mL过夜培养的菌液纯化得 到高达300-500 μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280=1.8-2.0)，可以直接用于 酶切、转化、测序及PCR等。
1. 快速、步骤少，整个操作在半个小时之内完成。
2. 离心柱最大吸附量为500 μg，100mL高拷贝的菌液一般能得到700 μg左右的质 粒DNA，100 mL低拷贝的菌液一般能得到150-350 μg质粒DNA。
3. 纯度高，采用本试剂盒提取的质粒OD比值在1.8-2.0之间。
4. 产量高，每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5 μg/mL。
5. 用途广，适用于低拷贝和高拷贝质粒。 6. 价格低，比多数国内同类产品的价格更便宜。 大提柱式质粒 DNAOUT使用及效果
收集50-100 mL过夜培养饱和菌液，离心弃上清后用6 mL溶液A重悬沉淀， 再与6 mL溶液B混匀，再加入8 mL溶液C，混匀，室温静止2分钟，离心10分钟， 将上清转移到DNA纯化柱中，静置2分钟，离心后弃收集管中的废液，用10 mL的 通用洗柱液洗涤离心柱两次。干甩一次，将离心柱置于新的50 mL离心管（自备） 中，用1 mL DNA洗脱液洗脱2-5次即得质粒DNA。
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文献和实验2, 其它稳定剂和增强剂 三DNA提取相关产品 1.柱式小量质粒DNA抽提纯化试剂盒：MTL001-1 50次 79元 2.DNA胶回收试剂盒： MTL002-1 50次 89元 3.动物DNAout（动物DNA提取试剂盒）：3670-10 10 ml 90元 4.植物DNAout（植物DNA提取试剂盒）：3672-10 10次 90元 5.血液DNAout(血液DNA提取试剂盒)： 3671-10 10 次 90元 6.革氏阴性细菌DNAout提取试剂盒： 3673-10 10 次 90元
等。 PCR 产物 两种方式：一种纯化后直接酶切连接；一种连 T 载体再往下切连接。我个人强烈建议第二种，连 T 载体。因为 PCR 产物直接酶切我觉得有两个缺点：①由于两头把手太短，虽说有保护碱基，但我觉得还是不如从质粒上往下切好切，而且容易切坏、切碎；②无法从电泳上看出来切没切开，因为也就切下了几个十几个 bp，带形没啥变化。连 T 载体的优点：①进载体后，大提一次的质粒夸张点说够用一辈子的，再说 PCR 那东西还不太稳定，一把多一把少的。②酶切会很清晰，切下来了就是有带，没切动
1. 质粒载体构建不成功（目的片段和载体不能成功连接）的常见原因分析 ①DNA 片段纯度差：体系中的杂质会降低连接效率，如果使用不纯化直接连接的方法一直无法成功构建载体，可以考虑进行纯化后再进行连接； ②目的片段和载体片段使用比例悬殊，或者用量过多或过少：目的片段和载体的摩尔比需要控制在一定范围之内，否则会影响连接效率，具体比例可以草靠连接酶说明书； ③连接条件不当：比如连接时间不足、温度不合适、酶失活等，可以通过设置对照组来排查原因； ④引物设计问题：比如通过无缝克隆的方式进行连接，同源
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