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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输及保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Maxi Column Fungal DNAOUT
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
4次
柱式真菌DNAOUT(CAT#:70901)基础上改良而得的大提 升级产品,主要用于大量快速从各种真菌材料中提取基因组DNA。跟柱式真菌 DNAOUT相比,它具有下列特点:
1. 处理量大,一次可以处理1-3克各种真菌组织。
2. 纯度高,OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制剂,得到的DNA可以 不经稀释直接用于酶切、PCR、 real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、 RFLP、AFLP、Southern Blotting,microsatellite analysis等各种后续分子 生物学实验。
3. 产率一般在10-100 μg/g真菌样品。离心吸附柱最大吸附量为800 μg。
4. DNA片段长度一般在20-40 Kb左右。
5. 适用范围广,适用于绝大多数真菌材料,包括酵母(S. cerevisiae,S. pomb,Pichia pastoris)等。
大提柱式真菌DNAOUT使用及效果
将10-30 mL 真菌细胞沉淀或1-3 g左右的真菌菌丝、孢子和子实体在液氮中研 磨,转移到50 mL塑料离心管中,加入10 mL溶液A和0.1 mL RNase A,吹打混 匀,65℃保温5-10分钟后离心5分钟,转移上清到一新的50 mL离心管中,加入等 体积溶液B,混匀后冰浴5分钟,离心5分钟,再转移上清到一新离心管中,加入1.5 倍体积(跟总体积比)的溶液C,混匀后转移到大提离心吸附柱中,室温放置5分钟 后离心5分钟,用25 mL通用洗柱液洗两次,空甩半分钟,将大提离心吸附柱转移 到新的50 mL离心管中,加1 mL DNA洗脱液,室温离心即得DNA。
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文献和实验2, 其它稳定剂和增强剂 三DNA提取相关产品 1.柱式小量质粒DNA抽提纯化试剂盒:MTL001-1 50次 79元 2.DNA胶回收试剂盒: MTL002-1 50次 89元 3.动物DNAout(动物DNA提取试剂盒):3670-10 10 ml 90元 4.植物DNAout(植物DNA提取试剂盒):3672-10 10次 90元 5.血液DNAout(血液DNA提取试剂盒): 3671-10 10 次 90元 6.革氏阴性细菌DNAout提取试剂盒: 3673-10 10 次 90元
等。 PCR 产物 两种方式:一种纯化后直接酶切连接;一种连 T 载体再往下切连接。我个人强烈建议第二种,连 T 载体。因为 PCR 产物直接酶切我觉得有两个缺点:①由于两头把手太短,虽说有保护碱基,但我觉得还是不如从质粒上往下切好切,而且容易切坏、切碎;②无法从电泳上看出来切没切开,因为也就切下了几个十几个 bp,带形没啥变化。连 T 载体的优点:①进载体后,大提一次的质粒夸张点说够用一辈子的,再说 PCR 那东西还不太稳定,一把多一把少的。②酶切会很清晰,切下来了就是有带,没切动
柱式法 Minute TM 胞质胞核分离试剂盒操作方法:A. 悬浮细胞样品(包括植物,细菌,酵母和真菌制备的原生质体)1.500Xg,3 分钟低速离心收集细胞,用预冷的 PBS 清洗一次2. 将细胞转移到 1.5 ml 离心管中,3000 rpm 离心 1-5 分钟,弃去上清。3. 按表格 1 加入适量的胞浆提取缓冲液(请注意样品及裂解液的比例,以达到最佳效果), 涡旋大力震荡 15 秒, 冰上孵育 5 分钟, 混匀. 接转胞质胞核分离步骤。B. 贴壁细胞1. 贴壁细胞生长至融合度 90
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