- ¥190 - 1980
- KALANG
- 中国大陆
- KL1801
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2～8℃
- 保质期：
长期
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
25次|50次
TUREscript 1st Strand cDNA (第一链反转录试剂盒)
编号：KL1801规格：25次|50次
产品储存：－20℃保存，有效期12个月
注意事项:
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. 如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构，可以先只加RNA模板、引物和和RNase free H2O混匀，65℃变性5分钟，冰上冷却，短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。
制品说明：本制品以RNA 为模板，用TUREscript Hˉ RTase /RI Mix、2×RT Reaction Mix 高效合成第一链cDNA，操作简单。制品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H 活性缺失的M-MuLV 反转录酶TUREscript Hˉ RTase。野生型的M-MuLV 包含的RNase H 活性能够催化降解DNA/RNA 杂合体中的RNA，因此在cDNA 第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA 杂合体中的模板RNA。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H 活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA 合成以及高比例的全长cDNA 文库的构建等。
适用范围：第一链cDNA合成。可用于高拷贝、低拷贝基因的检测。
特点：合成cDNA片段长度最高可达12 kb。
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文献和实验冰上5min; 4. 稍微离心一下,顺序加入以下试剂: 4ul 5×first strand buffer 2ul 0.1M DTT 1ul 10mM dNTP(自己配制) 5. 混匀，稍微离心反应物之后,42℃放置2分钟; 6. 反应完成,趁热加入1 ul Superscipt II—RT,混匀; 7. 42℃反应50分钟,然后70℃,15分钟灭活反转录酶. 2. cDNA第二链的合成 1. 第一链
,42℃放置2分钟; 6. 反应完成,趁热加入1 ul Superscipt II―RT,混匀; 7. 42℃反应50分钟,然后70℃,15分钟灭活反转录酶.二. cDNA 第二链的合成 : 1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存，待电泳检测。其余的产物合并，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega): 20ul 10×DNA Polymerase I buffer 6ul 10mM dNTP(自己配制) xul dd
(Sigma #M0133) Notes This procedure produces 1st strand cDNA with an anchored oligo dT primer and AA-UTP. It then couples couples amino reactive Cy-dyes to the AA-UTP. For spotted arrays control RNA should also be labeled using the opposing dye
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