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-20℃
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长期
- 英文名:
EcoRI methyl transferase
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大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
50KU|10KU
EcoRI 甲基转移酶
规格:50KU|10KU英文名:EcoRI methyl transferase
概述:
EcoRI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧腺嘌呤残基(N6)进行甲基化修饰。
来源:
重组 E. coli 菌株,携带有从 E. coli RY 13(R.N. Yoshimori)克隆 EcoRI 修饰基因。
反应条件:
1X EcoRI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl,50 mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),10 mM EDTA]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
单位定义:
1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 EcoRI 限制性内切酶切割所需要的酶量。
浓度:
40,000 units/ml。
注意事项:
MgCl2 抑制 EcoRI 甲基转移酶活性。在存在 4 mM MgCl2 条件下,酶活只保留 50%。
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文献和实验wj1989113 最近在构建一个质粒。 根据我的目的基因序列,筛了两个酶切位点,而且只有这两个酶切位点能用,XbaI和EcoRI, 设计引物时XbaI 加了两个保护碱基,EcoRI 加了三个保护碱基。根据takara公司的说明,选择了共用Buffer1xM,酶切,连接,转化之后挑克隆,抽质粒酶切鉴定,发现都是空载体。网上说XbaI对甲基化敏感,有什么对策?因为我别无他选,只能用这两个酶。 不胜
第一个DNA甲基转移酶抑制剂(5-阿扎西替丁)在1964年首次合成,其作为抗癌剂的潜力很早就被认识到。20世纪80年代,在临床对这些制剂的最初研究中,将地西他滨作为经典的抗癌药物,其剂量为临床最大耐受剂量,每疗程1500 - 2500 mg/m(2),但收效甚微。只有当低剂量(那些没有细胞毒性,导致epigenetically沉默沉默基因的活化)取得任何重大进展,经过近40年5-azacytidine (Vidaza)最后获得FDA的批准在2004/2005专门治疗骨髓增生异常综合征(MDS
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