- ¥190 - 1980
- KALANG
- 中国大陆
- KL093
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
冷藏
- 保质期：
长期
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
500μl|5×500μl
2×pfu PCR MasterMix
编号：KL093规格：500μl|5×500μl
● 储存条件: -20℃可长期保存；4℃稳定贮存3个月。经常使用时，一旦融化后请4℃贮存，尽量避免反复冻融。
● 产品简介：
本产品包含pfu DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂，浓度为2×。使用时，只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应，可最大限度的减少人为误差，具有快速简便、稳定性好等优点。用于高保真的DNA*(代"片")段的扩增。使用该产品得到的PCR扩增产物为平滑末端，不可以直接用于TA克隆，要通过平滑末端克隆法进行克隆。
● 质量控制：以λ DNA为模板，可以很好扩增5kb的DNA*(代"片")段；以水稻基因组为模板，可以很好扩增3.2kb的DNA*(代"片")段。
● 使用说明：1. 冰浴中彻底融化2×MasterMix，混匀后Minispin将溶液收集到管底。
2. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系： 50μl反应体系 终浓度
2×MasterMix 25μl 1×
上游引物 10μM 1-5μl 0.2-0.8 μM
下游引物 10μM 1-5μl 0.2-0.8 μM
模板 × μl 10pg-1μg
水 补至50μl
3. 快甩离心将反应液收集到管底。
4. PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
5. PCR仪上执行以下程序：步骤 温度 时间 循环数
初始变性 94℃ 5 min 1
变性 94℃ 30 sec 25-40*
退火 Tm-5℃* 30 sec
延伸 72℃ 0.5kb/min
最后延伸 72℃ 5 min 1
*注： PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件（温度、时间等）。
6. 电泳检测。
注：使用含染料的2×MasterMix可以直接上样；不含染料的2×MasterMix要与6×loading buffer混合后上样。
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文献和实验μL 体系 2× MasterMix 25 μL 上游 Primer （ 10 μM 1-5 μL 下游 Primer （ 10 μM ） 1-5 μL 模板 lamid DNA ～ 50 ng genomic DNA ～ 1000 ng cDNA ～ 500 ng 粗提液 ～ 2 μL 灭菌蒸馏水至 50 μL PCR 扩增实例： 一、plasmid DNA 扩增 1．提取的质粒 DNA 扩增 以pUC19 质粒为模板扩增 100，250，500
请教：高保真酶 关于taq plus 求教Pfu酶作PCR的要求 Pfu扩增求救！！！！ 请问哪一种高保真DNA聚合酶比较好呢？ Pfu DNA 聚合酶的问题 pfu的扩增条件！ 关于高保真酶问题？ 求助：高保真酶 关于高保真酶 关于高保真的酶 pfu高保真酶怎么那么难用？ Pfu DNA聚合酶------常见问题 请教如何做病毒的 pfu 请教Pfu扩增2kb片段 高保真酶咋还不如普通的Taq酶? 请教关于高保真酶问题 哪个公司
【分享】Taq DNA聚合酶、Pfu DNA聚合酶等酶的特点及应用
扩增GC含量较高或二级结构较复杂的模板：Taq Plus、Long Taq、Taq Platinum 实时荧光定量PCR反应：Taq、Hotstart Taq、Taq Platinum 从菌株或质粒模板，筛选鉴定目的克隆，扩增6kb以下的片段：Taq、Taq Plus、2×Taq PCR MasterMix 模板比较复杂或目的片段丰度低，用普通Taq酶扩增不出条带：2×Taq PCR MasterMix、2×Pfu PCR MasterMix
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