- ¥990
- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY80901-5
- 2025年07月31日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输，4℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Maxi Column Animal RNAOUT
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
5次
柱式动物RNAOUT（CAT#：71201）的大提升级产品，可用 于从各种动物组织（包括白细胞）中大规模快速提取总RNA。跟柱式动物RNAOUT
相比，其主要特点是：
1. 大规模提取，一次最大可以提取到80-100 μg的动物总RNA。
2. 操作简单快速，整个过程只需要不到二十分钟（对一个样品而言）。
3. RNA纯度更高，OD260/OD280一般在2.0左右。
4. 一般不含有电泳可以检测到的基因组DNA污染。
5. 适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
6. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
大提柱式动物RNAOUT使用及效果
将1-2 g左右的动物组织加入到10 mL溶液A中匀浆，然后加入2 mL自备氯， 震荡60秒后室温离心3-5分钟，转移上清液，在上清液中加入等体积溶液B，混匀， 加入到离心吸附柱中，离心1分钟，用通用洗柱液洗吸附柱2次，干甩后分别用1 mL RNA洗脱液洗两次得到RNA(共2 mL)。
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文献和实验在 RIPA 不可溶组分中，如果样品又是研磨困难的组织样品，则优先选择对膜蛋白和小分子量蛋白提取效率更高且不需要匀浆仪的 Invent 柱式法工具进行总蛋白提取[1]。 * 目标蛋白在某个特定细胞器上（内质网，高尔基体，溶酶体，线粒体，内体等）表达，且蛋白表达量较低，若用总蛋白检测时条带较弱，则推荐使用 Invent 柱式法工具富集特定细胞器蛋白后再检测，提高检出效率。 * 研究蛋白定位或研究蛋白转运过程，推荐使用 Invent 柱式法工具进行细胞组分分离，将样品分离为不同组分如分成细胞核，细胞浆，细胞
2.1 总RNA 提取 ………………………………………… 2.2 RT-PCR……………………………………………… 2.3 琼脂糖凝胶电泳…………………………………… 材料与方法 1. 材料 1.1 供试用动物组织/ 细胞 1.2 主要仪器设备 1.5ml 离心管、0.2ml PCR 管、高速离心机、5~10ul 加样器、2~20ul 加样器、20~200ul 加样器、TAKARA PCR 仪、551 可见光透射
等。 PCR 产物 两种方式：一种纯化后直接酶切连接；一种连 T 载体再往下切连接。我个人强烈建议第二种，连 T 载体。因为 PCR 产物直接酶切我觉得有两个缺点：①由于两头把手太短，虽说有保护碱基，但我觉得还是不如从质粒上往下切好切，而且容易切坏、切碎；②无法从电泳上看出来切没切开，因为也就切下了几个十几个 bp，带形没啥变化。连 T 载体的优点：①进载体后，大提一次的质粒夸张点说够用一辈子的，再说 PCR 那东西还不太稳定，一把多一把少的。②酶切会很清晰，切下来了就是有带，没切动
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