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- KALANG
- 中国大陆
- KL229
- 2025年07月14日
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康朗生物
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20ul×125次|20ul×500次
miRNA 荧光定量检测试剂盒(SYBR Green)
编号：KL229规格：20ul×125次|20ul×500次
产品简介 miRcute miRNA 荧光定量检测试剂盒（SYBR Green）中包含miRNA荧光定量检测的所有试剂，包括2×miRcute miRNA Premix 和Reverse primer。2×miRcute miRNA Premix 是专门为miRNA 检测而研发的新一代荧光定量检测试剂， 该检测试剂采用Premix 预混系统，包含了优化配比的dNTP、增强剂、稳定剂等，且其中的DNA Polymerase 采用的是新一代抗体修饰的热启动技术，保证高特异性和高灵敏度。同时，还加入了ROX 作为内参染料，以使实时荧光定量PCR 结果准确可靠。 产品特点 ■ 通量高：可用于从一个合成反应的cDNA 中检测多种miRNAs。 ■ 特异性：性能优良的抗体热启动PCR 聚合酶技术及其优化的反应体系避免了非特异性扩增。 ■ 分辨率高：能分辨单碱基差异的miRNA。 ■ 灵敏度高：可在低至pg 级的总RNA 中检测到特异表达的miRNA 自备试剂 分子生物学实验级别的水（无核酸酶）、PCR上游引物（Forward Primer） 保存条件 -20℃避光保存 适用范围 ■ 对miRNA 反转录后的cDNA 进行荧光定量PCR 检测。 ■ 适用于各种类型荧光定量PCR 仪。
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文献和实验PCR过程。（2）SYBR荧光染料法：该方法利用了SYBR Green荧光染料非特异性与双链DNA结合并发光的特性，检测PCR的全部进程，从而判定初始RNA的量。 常用的miRNA第一链合成方法成熟的miRNA大小只有22nt左右，在用实时荧光定量PCR检测miRNA时，难点在于如何识别如此小的miRNA并合成第一链。目前常用的用于识别并合成miRNA第一链的方法主要有颈环法和加尾法两种。（1）颈环法原理图（2）加尾法原理图由于成熟miRNA较小，无法用常规的方法直接进行反转录、PCR
，目标靶mRNA降解导致表达水平的下降，而第二个实验中荧光素酶转录本仅仅下降1.2倍，这种目的基因表达水平下看起来象源于miRNA介导的翻译抑制降，而不是siRNA介导的影响mRNA的稳定性导致。实验表明：siRNA可能以miRNA的方式作用于mRNA。实验人员还进行了另一个实验：改变第二个实验中的不匹配环的碱基序列看起来不影响抑制效果，但是siRNA和报告基因上的结合位点的匹配程度越高抑制效果越好，增加siRNA的量，抑制效果越好――这一点和抑制的情况一样――唯一不同的是：完全匹配的结合
实时荧光定量PCR从1996年美国AppliedBiosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来，该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中，成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种：（1）TaqMan荧光探针法：该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时，荧光基团发光被淬灭基团吸收；在PCR扩增过程中，探针被降解，荧光基团与淬灭基团分离，发出可被检测到的荧光，以此来监测整个PCR过程。（2）SYBR荧光染料法：该方法
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