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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃/6个月,-20℃/12个月,分装避免反复冻融
- 保质期:
4℃/6个月,-20℃/12个月
- 英文名:
Hoechst 33342/PI Double Stain Kit
- 库存:
大量现货
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- CAS号:
点击查看
- 规格:
1 Kit(100 T)(40744ES60)
产品描述:
Hoechst 33342/PI 双染试剂盒(Hoechst 33342/PI Double Stain Kit)采用Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)双染的方法以区分凋亡细胞和坏死细胞的试剂盒。其检测原理是:细胞核荧光染料Hoechst 33342可以穿透细胞膜,嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。对于正常细胞,其可少许进入细胞膜使其染上低蓝色。而凋亡细胞由于细胞膜通透性增强,从而使得进入凋亡细胞内的Hoechst 33342明显多于正常细胞,荧光强度比正常细胞要高。另外,细胞发生凋亡时染色质会固缩,从而使得染料能更有效和聚集的结合于DNA,并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受损而不能有效的将Hoechst 33342排除到细胞外使其在细胞内的积累增加,这些特征都使得凋亡细胞经染色后荧光会比正常细胞明显增强。但细胞核荧光染料PI不能穿透细胞膜完整的正常细胞或凋亡细胞,即活细胞对PI染料拒染。而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性在早期即已丧失,可被PI染色。
经上述两种染料双染后,使用流式细胞仪或荧光显微镜检测时,正常细胞为弱红色荧光+弱蓝色荧光,凋亡细胞为弱红色荧光+强蓝色荧光,坏死细胞为强红色荧光+弱蓝色荧光。
产品特色:
本试剂盒染色快速方便,可用一步法或者两步法进行染色。使用流式细胞仪检测时,无需稀释等配制过程,也无需再准备其它任何溶液。本试剂盒足够检测100个样品,每个样品的细胞数量可达105-106个。
储存条件:
冰袋运输。 4℃保存,有效期12个月。-20℃保存,有效期24个月,建议分装避免反复冻融。
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文献和实验[2] Li X, Fu G, Zhang L, et al. Assay establishment and validation of a high-throughput organoid-based drug screening platform. Stem Cell Res Ther. 2022;13(1):219. Published 2022 May 26. doi:10.1186/s13287-022-02902-3(IF:6.832)
[3] Gao X, Liu S, Tan L, et al. Estrogen Receptor α Regulates Metabolic-Associated Fatty Liver Disease by Targeting NLRP3-GSDMD Axis-Mediated Hepatocyte Pyroptosis. J Agric Food Chem. 2021;69(48):14544-14556. doi:10.1021/acs.jafc.1c05400(IF:5.279)
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1.悬浮生长的细胞在培养状态下加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml;帖壁生长的细胞用含有0.02%EDTA的0.25%胰蛋白酶消化成单细胞悬液,离心,弃上清,用1ml全培养液重悬细胞,加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml,37℃孵育7~10min。 2.4℃ 500~1000r/min离心弃去染液。 3.加入1.0ml PI染液,4℃避光染色15min。 4.400目的筛网过滤1次。 5.流式细胞仪分析。
发现Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果。Hochest/PI双染 astra: 请问用hoechst33258可以和PI进行双染可以么?查了很多实验手册,都是单染,由于没有经验,所以能不能麻烦你提供双染的实验流程? midas: 当然可以。以下步骤供参考: 1、向细胞中加入用0.01MPBS溶解的Hoechst33342,终浓度为10μg/ml,37℃反应10min; 2、继续加入用0.01MPBS溶解的PI,使它的终浓度为10μg/ml,4℃反应20min; 3、直接
流式细胞仪检测细胞凋亡——Heochst 33342/PI双染色
地将Hoechst 33342排出到细胞外使之在细胞内积累增加等有关。既然Hoechst 33342进入凋亡细胞中比正常细胞更容易,而EB、PI或7-AAD等染料是不能进入细胞膜完整的活细胞中,即正常细胞和凋亡细胞在不经固定的情况下对这些染料是拒染,坏死细胞由于膜完整性在早期即已破损,可被这些染料染色。根据这些特性,用Hoechst 33342结合PI或EB等染料对凋亡细胞进行双染色,就可在流式细胞仪上将正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞区别开来。在双变量流式细胞仪的散点图上,这三群细胞表现分别为:正常细胞为低蓝色
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