- ¥190 - 1980
- KALANG
- 中国大陆
- KL272
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2～8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
One Step RT-PCR Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
50μl×50次|50μl×100次
一步法耐热反转录PCR试剂盒
英文名：One Step RT-PCR Kit编号：KL272
规格：50μl×50次|50μl×100次
储存：－20℃，有效期6个月。
产品说明：
本试剂盒是专为一步法RT-PCR实验配制的，使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录反应和PCR扩增反应。反应过程中无需打开管盖添加试剂，避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包括多点突变改造耐热M-MuLV H Minus逆转录酶、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasin抑制剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。同时该酶可以在高达50-60℃反转录，大大提高了复杂二级结构，GC含量丰富模板反转录效率，产量敏感度和特异性比一般试剂盒显著特高。
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文献和实验请教real time PCR的RT部分能否使用传统半定量RT-PCR试剂盒的反转录部分？
各位老师： 您们好！偶欲做几个基因的RT-PCR实验。偶先用传统的半定量两步法RT-PCR试剂盒(TaKaRa DRR019A)扩增了几个基因，并用该试剂盒反转录了不少cDNA。但还有2个基因偶打算用real time PCR法来扩增。拟采用TaKaRa DRR041S试剂盒。但是TaKaRa DRR041S试剂盒说明书上写的反转录步骤是使用另外一个单独的RT Reagents (TaKaRa DRR033A)，得到cDNA再用TaKaRa DRR041S试剂盒扩增。但是仅一个RT
-Adaptor Primer 适用于具有 Poly(A)+ tail 的 RNA。 注： 原核生物的 RNA、真核生物的 rRNA 及 tRNA (某些种类真核生物的 mRNA)不具有Poly(A) tail.本 Primer 设计巧妙，反转录效率高。反转录反应后，用 M13 Primer M4 可进行 3'-RACE。 一步法和两步法 一步法： 利用同一缓冲液，在同一体系中加入逆转录酶、引物、Taq 酶、4 种 dNTP 直接进行 mRNA 反转录与 PCR 扩增。发现 Taq 酶不仅具有 DNA
RT—PCR 反应更加快速、灵敏，操作简便，污染率低，RNA 二级结构减少，并且因为聚合酶有校正活性，从而降低了 PCR 反应的错配率。而在两步法中，反应的精确度高，人为的误差相对较小，并且由于在第一步中将 RNA 反转录为 cDNA，从而更易于保存。 另外，两步法的整个过程比一步法更节省费用。传统检测方法的样品用量一般在 ug 级，而在 RT—PCR 检测系统中样品用量陡降至 pg 级。这就在很大程度上降低了实验操作的难度，特别是 mRNA 样品制备的过程得以简化。 3. 应用 对基因
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