L-苏氨酸，72-19-5，T8625

PCR 不必“摸条件”

μL 体系 2× MasterMix 25 μL 上游 Primer （ 10 μM 1-5 μL 下游 Primer （ 10 μM ） 1-5 μL 模板 lamid DNA ～ 50 ng genomic DNA ～ 1000 ng cDNA ～ 500 ng 粗提液 ～ 2 μL 灭菌蒸馏水至 50 μL PCR 扩增实例： 一、plasmid DNA 扩增 1．提取的质粒 DNA 扩增 以pUC19 质粒为模板扩增 100，250，500

CAR-T细胞的特异性杀伤及耗竭表征

批次的未耗竭CAR-T细胞进行比较。每天从检测板的所有孔中提取细胞因子样品（10 μL），72小时后，使用iQue®人类T细胞耗竭试剂盒对细胞和上清液进行量化。结果如图3所示。   图3. CD19+ Ramos细胞系激发抗-CD19的CAR-T细胞表现出明显的耗竭表型 细胞因子的分泌，包括IFNγ和TNFα，在含有耗竭的CAR-T和Ramos细胞共培养的孔中均很低（图3A和B）。相对而言，新鲜CAR-T细胞分泌的IFNγ和TNFα水平明显较高，48小时的峰值浓度分别为3.5±0.2 ng

Single tube confirmation PCR protocol

containing 60 U/ml of Zymolyase (This solution is generated by resuspending 6 mg of 100T Zymolyase in 10 mls of water. Ordering information: Seikagaku Corp., #120493-1). - Sterile yellow tips work great for this task. - Repeat this step