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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
PCR Kit with YT Taq
- 库存:
947
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
400次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
PCR试剂盒(含YT Taq酶,Buffer,dNTP,上样液)厂家直销是高品质的核酸扩增(PCR),由北京百奥莱博供应,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多PCR试剂盒(含YT Taq酶,Buffer,dNTP,上样液)等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。
名称:PCR试剂盒(含YT Taq酶,Buffer,dNTP,上样液)厂家直销
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:YT381
规格:400次
本PCR试剂盒带有YT Taq DNA Polymerase(YT373)、PCR buffer、dNTP和上样缓冲液,自备模板和引物即可进行PCR反应,适合用于各种常规PCR以及T载体克隆、点突变等,能在高效扩增DNA模板的情况下同时保证高保真性。本试剂盒用于50微升的PCR反应体系,足够用于160个反应,用于20微升的PCR反应体系,足够用于400个反应。
产品组份:
YT Taq DNA Polymerase (5U/μl)————200U
10×Taq Buffer (with Mg2+)——————1ml
dNTP (2.5mM each)——————————0.7ml
6×DNA Loading Buffer————————1ml×2
储存条件:-20℃
更多有关PCR试剂盒(含YT Taq酶,Buffer,dNTP,上样液)厂家直销的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
·Western一抗二抗清除剂(酸性)
编号:YT074
英文名称:Antibody Stripping buffer(Acidic)
规格:250ml
本品用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱。但是,本Western一抗二抗去除液,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5次。使用本试剂只需大约40-80分钟即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western操作。
百奥莱博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。
抗体清除剂选型表:
| 产品编号 | YT071 | YT072 | YT073 | YT074 |
| 产品名称 | Western一抗二抗清除剂(强碱性) | Western一抗二抗清除剂(弱碱性) | Western一抗二抗清除剂(中性) | Western一抗二抗清除剂(酸性) |
| 产品包装 | 250ml | 250ml | 250ml | 250ml |
| pH | 强碱性 | 弱碱性 | 中性 | 酸性 |
| 对于膜上蛋白的保留效果 | 好 | 好 | 好 | 好 |
| 对于一抗二抗的去除效果 | 好 | 好 | 好 | 好 |
| 去除一抗二抗所需时间 | 15-20分钟 | 20-30分钟 | 20-30分钟 | 40-80分钟 |
| 适用膜的类型 | PVDF和NC | PVDF和NC | 仅PVDF | PVDF和NC |
| 腐蚀性 | 强 | 弱 | 无 | 弱 |
用于普通的Western检测时蛋白膜上一抗二抗的去除可以任选一种去除液。如果是NC膜,即硝酸纤维素膜时,不宜选用YT071N。从时间角度考虑,强碱性、弱碱性和中性的去除液所需的时间都比较短,可以优先考虑。从价格因素考虑,强碱性的去除液性价比最高。从安全性考虑,中性的去除液由于没有腐蚀性而表现出更高的安全性。弱碱性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正确操作,并进行适当防护,使用强碱性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
对于特定的抗原和抗体,很难说哪一种Western一抗二抗去除液的效果最好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳时,可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间,同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液,以摸索出最佳的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。
注意事项:
1. 使用辣根过氧化物酶(HRP),任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶,如果使用碱性磷酸酯酶,任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。
2. 为取得最佳效果,推荐使用PVDF膜。但硝酸纤维素膜也可以使用本Western一抗二抗去除液。
3. 使用化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测,例如DAB,NBT/BCIP,不适用于本试剂。
4. 本Western一抗二抗去除液有轻微腐蚀性,使用时请注意防护。
储存条件:室温,有效期一年。
PCR试剂盒(含YT Taq酶,Buffer,dNTP,上样液)厂家直销关键词:含YT Taq酶,Buffer,dNTP,上样液,YT381,PCR Kit with YT Taq,PCR试剂盒(含YT Taq酶,Buffer,d,PCR试剂盒(含YT Taq酶,Buffer,dNTP,上样液)
·C端mCherry标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)
编号:YT467
英文名称:C-mCherry plasmid(with CMV promoter)
规格:1μg
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒,用于表达C端含mCherry (DsRed的突变体,一种非常明亮的红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个mCherry的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有mCherry标签的融合蛋白。利用mCherry的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用mCherry抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。mCherry与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测mCherry。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Multiple cloning site | 651-736 |
| mCherry | 741-1451 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1501-1522 |
| SV40 polyAsignal | 1534-1917 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2055-2361 |
| bla promoter | 2386-2510 |
| SV40 promoter | 2530-2868 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2903-3694 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3695-4153 |
| pUC origin | 4282-4949 |
本质粒(5001bp)的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
PCR试剂盒(含YT Taq酶,Buffer,dNTP,上样液)厂家直销关键词:含YT Taq酶,Buffer,dNTP,上样液,YT381,PCR Kit with YT Taq,PCR试剂盒(含YT Taq酶,Buffer,d,PCR试剂盒(含YT Taq酶,Buffer,dNTP,上样液)
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56-81-5 甘油 Glycerol
磷霉素钠 dATP,2Na 26016-99-9
DL-4-羟基-3-甲氧基扁桃酸 L-Aspartic acid sodium salt 55-10-7
N-乙酰-DL-蛋氨酸 4-Methylcatechol 1115-47-5
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文献和实验请教real time PCR的RT部分能否使用传统半定量RT-PCR试剂盒的反转录部分?
Total RNA X 总体积 10 总体积 10 DRR033A的RT配方居然连镁离子都没有,是不是含在5×M-MLV Buffer中了?这2种体系(其实就是2种逆转录酶)的镁离子浓度差别有多大?能否造成扩增反应的不同?dNTP的量也差了一倍,能相互通用吗?恳请高手们解密!不甚感激!
。人工合成的引物是否正确。是否纯化,或因储存条件不当而失活。(6)使用PCR试剂盒时还应注意:①是否严格按照说明书操作;②试剂使用前是否充分混匀;③试剂储存过久或不当而失效。(二)扩增产物在凝胶中涂布或成片状(1)酶量过高。减少酶量;酶的质量差,调换另一来源的酶。(2)dNTP浓度过高。减少dNTP的浓度。(3)MgCl2浓度过高。可适当降低其用量。(4)循环次数过多;增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用二种温度的PCR循环。(5)退火温度过低。(6)电泳体系有问题:①凝胶中缓冲
不彻底。 (4)反应系统中污染了蛋白酶及核酸酶,应在未加Taq酶以前,将反应体系95℃加热5-10分钟。 (5)引物变质失效。人工合成的引物是否正确。是否纯化,或因储存条件不当而失活。 (6)使用PCR试剂盒时还应注意: ①是否严格按照说明书操作; ②试剂使用前是否充分混匀; ③试剂储存过久或不当而失效。 2. 扩增产物在凝胶中涂布或成片状 (1)酶量过高。减少酶量;酶的质量差,调换另一来源的酶。 (2)dNTP浓度过高。减少dNTP的浓度。 (3)MgCl2浓度过高。可适当降低
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