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- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
Annealing Buffer for RNA Oligos (5X)
- 库存:
515
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
1ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括RNA寡核苷酸退火缓冲液优惠在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:RNA寡核苷酸退火缓冲液优惠
产地:国产|进口
规格:1ml
英文名:Annealing Buffer for RNA Oligos (5X)
编号:YT529
本Buffer是一种经过我们多次实验证实、可以用于RNA oligo退火的缓冲液。用于siRNA而合成的互补的RNA oligo可以用该退火缓冲液进行退火,以形成双链RNA。使用百奥莱博的Annealing Buffer for RNA Oligos(5X),可以有效避免RNA oligo自身形成发夹结构,有利于退火的正确进行。
使用本试剂盒操作非常简单,只需把待退火的RNA oligo和Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)按照一定比例混合后,置于PCR仪上,约60分钟即可完成。
本品经过特殊处理,不含RNase,可避免RNA的降解。如果一次退火反应体积为100微升,一个包装的退火缓冲液可以进行50次退火反应。
注意事项:
1. 本品只适合于RNA oligo的退火,不适合用于DNA oligo 的退火。如需DNA oligo的退火buffer,请购买百奥莱博的DNA寡核苷酸退火缓冲液(YT483)
2. 由于RNA非常容易被降解,一定要严格遵守RNA的操作规范,防止RNase污染。
储存条件:-20℃,有效期一年。
关于RNA寡核苷酸退火缓冲液优惠的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·Caspase-3抗体
编号:YT152
英文名称:anti-Caspase-3 antibody
规格:>20次
本抗体是用人工合成的人Caspase-3本身的切割位点处一段多肽,经适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度多克隆抗体。
本Caspase-3抗体可以识别全长的Caspase-3(35kD),也可以识别Caspase-3被剪切后产生的17kD片段。未发现和其它Caspase家族蛋白有交叉反应。
Caspase-3是细胞凋亡过程中最关键的执行分子(key executioner)之一,可以剪切细胞凋亡过程中的许多关键蛋白,例如PARP。Caspase-3的激活需要从没有活性的全长Caspase-3(35kD),在Asp28和Ser29之间及Asp175和Ser176之间进行剪切,产生有活性的17kD肽段。Caspase-3的激活常被作为细胞凋亡的一个重要指标。
组份:
Caspase-3抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
交叉反应性:人,小鼠,大鼠,猴
宿主:兔
免疫原物种:人
免疫原:人工合成的人Caspase-3本身的切割位点处一段多肽
抗体是别位点:Caspase-3
Caspase-3分子量:~35/17kD
克隆性:多克隆抗体
应用:WB,IP,IHC
推荐稀释比例:WB(1:1000),IP(1:50),IHC(1:500)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
RNA寡核苷酸退火缓冲液优惠关键词:Annealing Buffer for RNA Oligos (5X),RNA寡核苷酸退火缓冲液,YT529
·GL6-miR报告基因质粒
编号:YT444
英文名称:pGL6-miR Reporter gene plasmid
规格:1μg
pGL6-miR报告基因质粒是一种用于microRNA(miRNA)等研究的萤光素酶报告基因质粒。该质粒可用于把目的基因的3’非翻译区(3’-untranslated region, 3’-UTR)或其它适当序列插入到其多克隆位点,然后在哺乳动物细胞中高灵敏度地检测特定microRNA(miRNA)或其它非编码RNA等对该基因3’-UTR或其它靶序列调控活性的报告基因质粒。
pGL6-miR以pGL6质粒为模板,具有氨苄青霉素抗性,并在萤火虫萤光素酶基因之后添加了多克隆位点,便于插入目的基因的3’-UTR或其它适当的靶序列。
pGL6-miR的主要工作原理是,把目的基因的3’非翻译区(3’-untranslated region, 3’-UTR)或其它适当序列插入到萤光素酶基因(luc2)的下游,转染细胞并检测萤光素酶的表达。如果细胞内源或外源表达的miRNA与靶序列结合,通常会抑制萤光素酶的翻译或促进mRNA的降解,从而使萤光素酶的表达量减少。因此通过本报告基因质粒检测萤光素酶的表达水平,可以检测内源或外源表达的miRNA是否对插入的靶序列有调控作用。并且可以通过靶序列中预测的miRNA结合位点的突变,用于比较突变前后萤光素酶表达水平的变化。如果预测的miRNA位点突变后,miRNA的调控作用消失,则基本上说明突变的位点就是miRNA在靶序列中具体的结合位点。
pGL6-miR带有中低等强度的PGK启动子,有利于检测miRNA等对于萤火虫萤光素酶表达水平的下调作用,即当miRNA的抑制作用较弱时也能检测到。并且PGK启动子可以在人、大鼠、小鼠甚至酵母细胞中都可以发挥作用。
pGL6-miR质粒的主要信息如下:
| Base pairs | 6097bp |
| Feature Nucleotide | Position |
| PGK promoter | 20-538 |
| luc2 reporter gene | 549-2202 |
| Multiple cloning region | 2208-2261 |
| SV40 late poly(A) sinal | 2268-2512 |
| SV40 early enhancer/promoter | 2554-2972 |
| Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor)coding region | 2998-3792 |
| Synthetic poly(A) signal | 3817-3865 |
| Synthetic Beta-lactamase(Ampr) coding region | 4980-5840 |
| Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site | 5945-6097 |
pGL6-miR质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 插入靶序列:在pGL6-miR多克隆位点选取适当的酶切位点,经酶切处理后连入目的基因的3’-UTR或其它适当的靶序列。
3. 以此质粒为模板构建的质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT273)。
储存条件:-20℃。
RNA寡核苷酸退火缓冲液优惠关键词:Annealing Buffer for RNA Oligos (5X),RNA寡核苷酸退火缓冲液,YT529
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文献和实验μM)5μlNaCl 100 mM(终浓度)Tris‐Cl pH7.4 50 mM(终浓度)加水补足 50 μl将配制好的退火反应缓冲液重复混合,短暂离心后放置 PCR 仪上,运行以下程序: 90℃ 4 min, 70℃ 10 min, 55℃ 10 min, 40℃ 10 min, 25℃ 10 min。退火后的寡核苷酸可以立刻使用或者在 ‐20℃ 长期保存。三、 pCas9/gRNA 基因敲除载体的构建用 EcoRV 酶切 2 μg pCas9/gRNA 载体(inovogen)。通常
包括 3' 末端的多义碱基,如 dN(dA,dT,dG或dC)和 dV(dG,dA或dC)。该修饰可防止 poly(A)滑移,并且将起始位点锁定在 poly(A)尾的上游位置。这些引物被称为锚定oligo(dT)。 ❖ 随机引物是具有随机碱基序列的寡核苷酸,通常由 6 个核苷酸组成,被称为随机六聚体、N6 或 dN6。由于随机引物的随机结合(即没有模板特异性),其可以退火到样本中的任何类型 RNA。因此,这些引物被认为可以用于无 poly(A)尾结构(如 rRNA、tRNA、非编码 RNA
transcription,RT)与 PCR,可用于检测单个细胞或少数细胞中少于 10 个拷贝的 RNA 模板。 RNA 扩增包括两个步骤: 在单引物的介导下和逆转录酶的催化下,合成 RNA 的互补 cDNA;加热后 cDNA 与 RNA 链解离,然后与另一引物退火,并由 DNA 聚合酶催化引物延伸生成双链靶 DNA, 最后扩增靶 DNA。 cDNA 第二链的合成方法有以下几种: 1、自身引导法: 合成的单链 cDNA 3' 端能够形成一短的发夹结构,这就为第二链的合成提供了现成的引物,当第一链合成反应
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