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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
λ annealing buffer
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
A301555-100ml
英文名:λ annealing buffer
纯度或规格:pH7.6
SPU:A301555
CAS:-
存储温度:-
运输条件:常规运输
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文献和实验,不能得到足够的菌量来抽提质粒,摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型,导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多:容易导致裂解不充分,且容易超过硅胶膜柱的承载上限,最终使得质粒提取效率降低,建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当:比如在加入缓冲液重悬菌体时,菌体没有充分分散悬浮,导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解,可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂(QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂),均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用
μM)5μlNaCl 100 mM(终浓度)Tris‐Cl pH7.4 50 mM(终浓度)加水补足 50 μl将配制好的退火反应缓冲液重复混合,短暂离心后放置 PCR 仪上,运行以下程序: 90℃ 4 min, 70℃ 10 min, 55℃ 10 min, 40℃ 10 min, 25℃ 10 min。退火后的寡核苷酸可以立刻使用或者在 ‐20℃ 长期保存。三、 pCas9/gRNA 基因敲除载体的构建用 EcoRV 酶切 2 μg pCas9/gRNA 载体(inovogen)。通常
1.塑料离心管:62.刻度离心管:13. 滴管:长: 1 吸酚:氯仿混合液中: 1 吸乙醇短(钝口) : 1吸DNA水溶液4.细玻棒:15.移液管:16.微量取样器17.手套:1副8.离心机9.紫外分光光度计10.37℃水浴,50℃水浴11.组织捣碎器12.电泳仪及电泳槽试剂1.裂解缓冲液:50mmol/l Tris—Hcl pH7.420mmol/lEDTA、0.5%SDS100mmol/l NaCl配法: 1mol/l Tris—HCl pH7.4 50ml 20%SDS 25ml 2mol
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