北京NF-κB凝胶迁移突变探针(10μM)说明书

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北京NF-κB凝胶迁移突变探针(10μM)说明书是高品质的凝胶迁移EMSA，由北京百奥莱博供应，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多NF-κB凝胶迁移突变探针(10μM)等凝胶迁移EMSA产品请联系我司咨询订购。

名称：北京NF-κB凝胶迁移突变探针(10μM)说明书
编号：YT232
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的NF-κB consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－NF-κB的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应。

NF-κB consensus oligo的序列如下：
5"-AGT TGA GGG GAC TTT CCC AGG C-3"
3"-TCA ACT CCC CTG AAA GGG TCC G-5"

EMSA突变探针－NF-κB中NF-κB的公认的结合位点发生了突变，从而使NF-κB无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和NF-κB的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和NF-κB的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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·BiP抗体(GRP78抗体)
编号：YT650
英文名称：anti-BiP antibody
规格：>30次
本抗体是用人工合成的人BiP近氨基末端(N-terminus)的一段多肽(71-91位氨基酸),进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本BiP抗体识别的是总BiP(total BiP)，可以检测内源性的BiP。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测30次。

热休克蛋白(Heat shock protein,Hsp)是一类应激蛋白，包括Hsp20,Hsp60,Hsp70和Hsp90。这类蛋白具有分子伴侣功能，可以短时间(transiently)结合其它蛋白，并协助其它蛋白进行正确折叠。BiP(immunoglobulin heavy chain binding
protein in pre-B cells)，简称BiP，也称GRP78(78-kD glucose-regulated protein)，属于热休克蛋白Hsp70亚家族。该亚家族还包括mtHsp70/GRP75和GRP94。BiP/GRP78是一种钙离子结合分子伴侣，主要定位于内质网。BiP/GRP78是一种高度保守的对于维持细胞正常活性非常重要的蛋白。BiP/GRP78对保证蛋白进行正常的糖基化和折叠，膜蛋白和分泌蛋白的正确定位、以及阻截有质量问题的蛋白是必需的。

诱导内质网应激(ER stress)的刺激，如氧化应激，化学毒性，Ca2+离子载体，内质网Ca2+-ATPase抑制剂、糖基化抑制剂和缺氧等，可以诱导BiP/GRP78表达。葡萄糖饥饿也可以诱导BiP表达。当各种诱导条件导致ER中的蛋白折叠受到干扰并不能完全正常进行时，BiP的表达量就会被上调。随后BiP会结合到错误折叠的蛋白，以避免这些蛋白形成聚集物(aggregates)，并促进这些蛋白的正确折叠。BiP对于维持细胞稳态和防止细胞凋亡具有重要作用。BiP水平被认为是低血糖的可靠的分子标志物。在肿瘤细胞中，BiP的产生与防止凋亡、免疫系统攻击、抗肿瘤药物耐药性产生有关。在神经元细胞内出现谷氨酸兴奋性毒性和氧化应激条件下，BiP表现出神经保护作用。在阿尔茨海默病病变大脑，BiP水平下降；研究发现，BiP低表达与Presenilin-1(PS-1)基因突变有关。BiP上调可以被认为是内质网应激的重要指标。

组份：
BiP/GRP78抗体————30μl
Western一抗稀释液————30ml

交叉反应性：人，小鼠，大鼠，仓鼠，鸡，非洲瓜蟾
抗体识别位点：BiP N-terminal
分子量：～78kD
宿主：兔
免疫原物种：人
免疫原：人工合成的人BiP近氨基末端的一段适当修饰的多肽(71-91位氨基酸)
应用：WB,IC
推荐稀释比例：WB（1:1000）, IC（1:300）

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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