北京NF-κB凝胶迁移突变探针(10μM)多少钱

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名称：北京NF-κB凝胶迁移突变探针(10μM)多少钱
英文名：NF-κB Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格：30μl
编号：YT232
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的NF-κB consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－NF-κB的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应。

NF-κB consensus oligo的序列如下：
5"-AGT TGA GGG GAC TTT CCC AGG C-3"
3"-TCA ACT CCC CTG AAA GGG TCC G-5"

EMSA突变探针－NF-κB中NF-κB的公认的结合位点发生了突变，从而使NF-κB无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和NF-κB的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和NF-κB的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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·T4 DNA聚合酶
编号：YT403
英文名称：T4 DNA Polymerase
规格：50U
本品是一种模板依赖的DNA聚合酶，可以在结合有引物的单链DNA 模板上，从5"→3"方向催化DNA合成反应。T4 DNA Polymerase具有3"→5"外切酶活性，但不具有5"→3"外切酶活性。

特点：T4 DNA Polymerase由于同时具有5"→3"DNA聚合酶活性和3"→5"DNA外切酶活性，可以用于将5"端突出末端补平或3"端突出末端削平。T4 DNA Polymerase的3"→5"DNA外切酶活性对于单链DNA要比双链DNA活性更高，即单链DNA要比双链DNA中的非配对链部分更容易被T4 DNA Polymerase所消化。T4 DNA Polymerase的3"→5"外切酶活性比Klenow Fragment要高约200倍。

用途：
1）T4 DNA Polymerase可用于催化以下反应；
2）DNA 5"或3"突出末端的平滑化；
3）通过置换反应进行标记DNA探针合成；
4）定点突变过程中第二链的合成；
5）不依赖于连接反应的PCR产物克隆。

来源：本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。

活性定义：37℃30分钟时间内，催化10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。

活性检测条件：67mM Tris-HCl(pH8.8)，6.7mM MgCl2，1mM DTT，16.7mM(NH4)2SO4，0.2mg/ml BSA，0.033mM of each dNTP，0.4MBq/ml[3H]-dTTP，0.2mM 热变性且经DNA酶部分消化过的小牛胸腺DNA。

纯度：不含DNA内切酶，不含RNase。

酶储存溶液：20mM potassiu*(代"m") phosphate(pH7.5)，200mM KCl，2mM DTT，and 50% glycerol。

Reaction Buffer(5X)：335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃)，33mM MgCl2，5mM DTT，84mM (NH4)2SO4。

缓冲液兼容性：在百奥莱博的内切酶反应缓冲液1X O、1X R、1X Y、2X Y中的活性为100%，在1X B、1X G中的活性为75-100%。

失活或抑制：70℃加热10分钟可使T4 DNA Polymerase失活。金属离子螯合剂可以抑制T4 DNA Polymerase的活性。

储存条件：-20℃


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