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- 2025年07月12日
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文献和实验相关专题 分子量测定的实验方法与强兵利器 实验原理 葡聚糖凝胶(Sephadex)过滤法测定蛋白质分子 量的原理，主要是依据这种凝胶具有分子筛作用，一定型号的凝胶具有大体上一定大小的孔径。在一定的凝胶柱内，凝胶孔隙所占的体积称为内水容积Vi，凝胶颗粒间的自由空间所占的体积称为外水容积V0。当样品流经凝胶柱时，大于孔隙的大分子完全不滲入到凝胶内部，只需V0体积的洗脱液便可将其由一端洗脱到另一端；相反，如果样品体积小于孔隙
。还可以用梯度离心或其他方法进一步纯化。问：您的方法对我现在太有帮助有了，谢谢。但有几个地方不是很清楚，可以向你请教码？1、我的是鸡胚鸟囊液，病毒效价为1：640，只有6ml左右，效果怎样？2、第二步加等量10％PEG是什么意思？您用的PEG的分子量是多大的？10％是PEG溶液的浓度吗？3、最后 一步离心后还是收集沉淀吗？答：一般使用的是PEG6000就可以了。如果对样品的纯度不是严格要求的话，可以建议使用Millpore 公司的 离心浓缩柱，Amicon 系列的可以一次浓缩15ml样品。记得有一篇
胶条上覆盖矿物油，防止胶条水化过程中液体的蒸发。需缓慢的加入矿物油，沿着胶条，使矿物油一滴一滴慢慢加在塑料支撑膜上。 IPG 胶条的长度 矿物油体积 7 cm 1 ml 11cm 2 ml 17cm 3 ml 9. 对好正、负极，盖上盖子。设置等电聚焦程序 （以下程序为推荐程序，不同样品需要根据实际情况进行实验条件优化） 。 7cm 胶条 水化 12 小时（ 17 ℃） 被动水化 S1 250V 慢速 30 分钟 除盐 S2 1000V 快速 60 分钟 除盐 S3
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