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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
1年
- 英文名:
DNA transfection reagent
- 库存:
734
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
0.5ml|1ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售北京DNA转染试剂促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京DNA转染试剂促销
产地:国产|进口
编号:ALH430
规格:0.5ml|1ml
品牌:百奥莱博
本试剂采用独特配方的阳离子聚合物为主要成分,可以与DNA形成稳定的复合物,保护DNA免受核酸酶的降解,在增加核酸稳定性的同时, 提高转染试剂/DNA复合体穿越细胞膜的效率,这种独特设计,显著提高了基因转染效率。此类试剂是目前非病毒介导方法中效率最高的转染试剂(不同种类细胞的转染效率可有明显差异)。此外本品不被血清清除,血清和抗生素不影响其转染效果,转染试剂/DNA复合物可以直接加入完全细胞培养基中。本品的细胞毒性很小,在适宜的条件下,根据推荐用量使用本试剂进行转染实验,细胞存活率高于90%.每一批产品出厂前都要对其转染效率和毒性经过严格质控。 1ml本DNA转染试剂可进行500次转染(6孔板或35mm平皿)。
产品特点
1.适应于众多原代培养细胞和转化细胞株的基因转染
2.适用于瞬时转染和稳定转染
3.适应于贴壁细胞和悬浮细胞转染
4.转染效率高且稳定,在有无血清存在的细胞培养基中均能获得高效率转染
5.细胞毒性低
6..转染程序简单,转染实验可以在半小时内完成
注意事项:
1. 少量使用本试剂时,可取精确量的本试剂用无菌超纯水稀释一定倍数,以便精确取样量。该稀释液可在4℃保存1月左右。
2. 细胞的生长状态是转染效率的一个主要决定因素。在实验条件许可的情况下,使用高质量的培养液、优质血清等,可能会明显提高转染效率。
3. 本试剂在转染中不受血清影响,所以本试剂/DNA复合物能直接加到含血清的培养基中,但稀释本试剂和DNA的缓冲液不能混有血清,因为本品在制备本试剂/DNA复合物之前可能会与血清中的蛋白质反应,影响转染效率。
4. 如果细胞株很敏感,孵育2~4小时后除去转染复合物并加入含血清的新鲜培养基。
储存条件:4℃,有效期1年。
本品别名:DNA转染试剂|基因组转染试剂
北京DNA转染试剂促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·细胞组织总RNA提取试剂盒(非TRIzol法)
编号:ALH017
英文名称:Total RNA Extraction Kit From Cell & Tissue
规格:20次|50次
本试剂盒适用于快速提取各种细胞、组织总RNA,采用无苯酚、氯*(代"仿")RNA快速提取技术,独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份:
| 组份 | 20次 | 50次 |
| 裂解液RLT | 20ml | 50ml |
| 去蛋白液RW1 | 15ml | 40ml |
| 漂洗液RW | 5ml | 10ml |
| RNase-free H2O | 10ml | 10ml |
| 70%乙醇 | 4ml RNase-free H2O | 9ml RNase-free H2O |
| 吸附柱和收集管 | 20套 | 50套 |
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇, β-巯基乙醇,一次性注射器,研钵。
3. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液RLT 中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 小时,塑料器皿可在0.5
M NaOH 中浸泡10 分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留(一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁,请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前,直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联系我们索取具体操作说明书。
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性: RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40
储存条件:室温,有效期12个月。
北京DNA转染试剂促销关键词:基因组转染试剂,DNA转染试剂
·PAGE胶微量蛋白染色试剂盒(可脱色)
编号:ALH378
英文名称:PAGE protein staining kit
规格:250ml|1000ml
本试剂盒适用于快速检测PAGE胶上的微量蛋白质,它的敏感度几乎可以达到银染的敏感度(ng级水平或者更高),但是比银染简单、稳定、重复性高。染色液所含有的成份和PAGE胶中的SDS、TRIS共同作用形成特殊复合物沉淀在胶基质中形成白色的背景染色。有蛋白的地方,蛋白质的存在干扰这种复合物沉淀的形成,因此蛋白条带仍旧保持透明无色,在黑色的背景下,就可以清晰见到透明的蛋白条带。
试剂盒组份(250ml):
染色液—————————250ml
显色液—————————250ml
脱色液—————————125ml
产品特点:
1.电泳后采用两个简单步骤,15分钟内完成全部过程。
2.环保染料,完全不含有各种醋酸、甲醇等有毒有刺激性成份。
3.蛋白条带为不透明白背景上的透明条带,灵敏度为传统方法的10倍以上(纳克级或者更高)。
4.可逆染色,完全不影响蛋白性质,不影响抗体抗原结合性质。如果需要可以脱色15分钟后继续做蛋白电洗脱(切下特定条带脱色后洗脱下来可以用来做抗原生产使用)、定量、Western blot实验、质谱分析、N末端测序等。
5.在普通双蒸水中可以保留一年以上,不退色,缩小,蛋白质不扩散,一年后依然可以用来做Western blot等蛋白微分析。
操作步骤:
1. 染色
1) 电泳后用清水冲洗胶30-60 秒钟,然后将PAGE 胶放置于一个透明的玻璃培养皿中,根据胶大小倒入适量的染色液(确保胶都浸没在染色液内,20-25ml 足够染色一块普通的8×10cm mini 胶了),摇床上轻摇染色10-15 分钟(10-15%胶15 分钟,5-7.5%胶可缩短时间到10 分钟)。
2) 倒弃染色液,加入20-25ml 的显色液,立刻同时用手轻摇胶显色0.5-1 分钟(将透明培养皿放在一个黑色(暗)背景上观察条带出现情况,此时在不透明的白背景上应该看到透明的蛋白条带,不要显色时间过长,过长反而会降低分辨率)。
3) 看到满意条带后,用清水冲洗1-2 分钟后,放置于蒸馏水中保存。
2. 脱色
1) 根据个人需要将所需目的条带切下后或者直接整块胶加入适量脱色液,摇床上轻摇10 分钟或者直到脱色完全,最后用清水冲洗几次。
2) 现在胶可以用于蛋白电洗脱,Western blot 等操作,或者可以再用传统方法永久染色。
问题与解决方法
●没有见到条带可能的原因分析
1. 应该把透明培养皿放在黑色背景上看,条带为黑背景上面透明的条带。
2. 染色过头了。染色时要在暗背景上监测蛋白条带出现情况,一旦见到满意条带要立刻用蒸馏水冲洗停止染色。对于已经染色过头的胶,可以用脱色液部分脱色(胶脱色后,还可以再次反复染色)。
3. 蛋白浓度太低了,检测上样蛋白的浓度。
●干胶后,条带不见了可能的原因分析
这是一种可逆的负染色方法,干燥以后蛋白条带就和背景区分不出来了,因此不可以做成干胶。如果要长期保存,可以脱色后再用传统方法染色保存。
●染色后未脱色即直接转膜做Western blot效果不好可能的原因分析
应该脱色后才转膜做Western blot。
储存条件:室温避光,有效期12个月。
北京DNA转染试剂促销关键词:基因组转染试剂,DNA转染试剂
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